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目的探讨人肝细胞生长因子（hHGF）改造后重组hHGF（rhHGF）蛋白在P．pastoris酵母中二级结构的活性。方法根据酵母偏爱密码子和Kex2酶切识别位点，通过套叠PCR技术对hHGFcDNA进行改造并与pGEM—TEasy载体连接，蓝白癍筛选，Xba I／Sal I双酶切鉴定后测序。构建穿梭载体pPICZdA．rhHGF，XbaI／Xbo1酶切鉴定。将穿梭载体质粒用SacI单酶切线性化，转化Rpastoris GS115细胞，表型鉴定，拷贝数确定。采用甲醇诱导表达，选择表达量最高的l株进行温度控制