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目的构建狂犬病毒核蛋白(NP)基因的重组杆状病毒表达载体,在昆虫细胞中表达出具有免疫原性的抗原,用于狂犬病的检测及诊断。方法应用RT-PCR方法扩增ERA株狂犬病毒NP基因后克隆到PCR 2.1TA载体,转化One Short^TM TOP10感受态细胞构建TA克隆载体,并与pFastBac^TM1转座质粒载体分别用KpnI和NotI双酶切,用T4连接酶连接,构建pFast ERA-NP重组转座质粒,经双酶切、PCR扩增及插入序列方向鉴定后,转化到DH10Bae^TM E.coli感受态细胞,经三抗培养基