目的解决冻干甲型肝炎(甲肝)减毒活疫苗(Hepatitis A Attenuated Live Vaccine,Freeze-dried;HepA-L-Fd)原液生产的"瓶颈"问题,提高疫苗的产量。方法以转瓶培养为对照,采用细胞工厂培养人胚肺二倍体细胞,来增殖甲肝病毒,制备成试验疫苗,观察细胞的生长、病毒收获物中的病毒滴度、试验疫苗的质量,并对细胞工厂的可重复使用性进行初步研究。结果三批细胞工厂的平均细胞计数为1.16×105/cm2,其细胞产量明显高于转瓶培养(8.71×104/cm2);细胞工厂培养所得的收获物,病毒滴度的均值[8.56LgCCID50/ml(Median Infective Dose of CellCulture,50%细胞感染剂量)/毫升]比转瓶培养的病毒滴度均值(8.28LgCCID50/ml)有所提高;以此病毒收获物分别制备成的三批试验疫苗,各项检测指标均符合HepA-L-Fd质量标准。加速稳定性试验显示,疫苗在37℃存放14d后,病毒滴度仍保持稳定;未发现因重复使用细胞工厂而导致病毒滴度的下降。结论细胞工厂培养有节省培养空间、减少污染风险、缩短操作时间等优点,可替代转瓶,成为新一代用于疫苗规模化生产的细胞培养技术。