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目的
筛选并验证主要组织相容性复合物-Ⅰ(MHC-Ⅰ)限制性结核抗原肽作为结核感染γ干扰素释放测定(IGRA)试剂在HIV感染人群结核诊断中的临床应用价值。
方法以RD区编码蛋白为候选抗原，利用计算机软件预测与HIV感染人群MHC-Ⅰ高频分子高度亲和的CD8＋T淋巴细胞表位，人工合成含有CD8＋T淋巴细胞表位的多肽进行体外筛选试验，用筛选所得混合多肽池为IGRA试剂，与相对分子质量为6 000的早期分泌抗原靶(ESAT-6)和相对分子质量为10 000的培养滤液蛋白(CFP-10)比较，在HIV感染人群中的灵敏度和特异度。
结果最终获得8个重叠多肽池，Rv0222176-191、Rv1980c122-138、Rv1985c105-120、Rv3425141-165、Rv3873133-151、Rv3873158-166、Rv387878-86和Rv3879c673-690，可刺激结核患者外周血CD8＋T淋巴细胞产生γ干扰素，但对健康对照PBMC无刺激效应。在检测25例结核分枝杆菌合并HIV感染者血样时，由这8个重叠多肽池混合而成的IGRA刺激剂(CP)的灵敏度与rESAT6/CFP10(CE)的灵敏度均较低(68%比48%，χ2＝2.052，P＝0.152)，但二者共同作为IGRA刺激剂(CP＋CE)时灵敏度达92%，显著高于rESAT6/CFP10(χ2＝11.523，P<0.01)，且不影响特异度。
结论筛选出来的含CD8表位的RD区合成肽可提高IGRA试剂盒检测HIV感染/艾滋病患者的灵敏度，进而提高该人群的结核病检出率。