【摘 要】
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目的:探讨miR-320与结直肠癌临床病理因素间的关系,寻找其下游调控蛋白,及对结直肠癌细胞化疗敏感性的影响.方法:采用RT-PCR检测83例结直肠癌组织及癌旁组织中miR-320的表达,
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院普通外科教研室胃肠外科
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目的:探讨miR-320与结直肠癌临床病理因素间的关系,寻找其下游调控蛋白,及对结直肠癌细胞化疗敏感性的影响.方法:采用RT-PCR检测83例结直肠癌组织及癌旁组织中miR-320的表达,结合结直肠癌临床病理指标分析其相关性,用miR-320病毒转染HCT-116及ClonA1两株结直肠癌细胞系,Western blot检测其调控蛋白C-Jun氨基端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)的表达,采用四甲基偶氮唑蓝显色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测LV-miR-320细胞株与阴性对照组间对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)化疗的敏感性.结果:83例结直肠癌标本中miR-320的表达明显低于癌旁组织表达(P=0.012).miR-320表达与肿瘤分化程度相关,高分化组织中表达较中低分化组织高,与局部浸润深度及TNM分期相关(P=0.012,P=0.004),但不受患者性别、年龄、肿瘤的大小及位置的影响;获得LV-miR-320稳定转染细胞株及阴性对照株(negative control,NC),Western blot结果显示LV-miR-320组JNK表达明显降低;LV-miR-320组HCT-116及ClonA1半数抑制浓度(IC50值)分别为11.34 g/mL和12.56 g/mL,NC组IC50值分别为24.73 g/mL和25.34 g/mL(P=0.023,P=0.018).结论:miR-320在结直肠癌组织中呈低表达,其在结直肠癌细胞中过表达后,可明显抑制JNK蛋白翻译,而显著增加细胞对5-Fu化疗的敏感性.提示miR-320在结直肠癌的发生发展及治疗中起重要作用.
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