食品检测实验室质量控制与管理液相色谱

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  罗丹明B(Rhodamine B)又称玫瑰红B,或碱性玫瑰精,俗称花粉红,是一种具有鲜红桃色的人工合成染料,曾经用作食品添加剂,但后来实验证明罗丹明B致癌,现已不允许用作食品染色。作为一种具有潜在的致癌、致突变性的心脏毒性的人工合成碱性荧光染料,罗丹明B在市场上被不法商贩添加于调味品如辣椒面、辣椒酱、花椒、火锅底料等中,从中牟取利益。我国各地食品药品监督管理局曾多次对非法添加罗明丹B进行专项检查。因此,调味品中罗丹明B的测定研究可为食品监管部门提供技术支持,在保障食品安全方面具有重大意义。
  1.仪器设备
  安捷伦液相色谱-质谱联用仪1260-6460(软件版本:MassHunter Version B.06.00);SPS202F电子天平,梅特勒-托利多(常州)称量设备系统有限公司
  2.试剂及标准物质
  甲醇,色谱纯;甲酸(纯度88%);罗丹明B(纯度:98.6%)lot:40815。
  标准溶液配制:准确称取按其纯度折算为100%质量的标准品0.0100g,置于100mL容量瓶中,甲醇定容,配制储备液(0.1mg/mL);中间储备液:取1mL标准储备液于100mL容量瓶中,用甲醇水(1∶1)定容,中间储备液浓度(1000ng/mL);标准使用液:取1mL中间储备液于100mL容量瓶中,用甲醇水(1∶1)定容,配制成标准使用液(10ng/mL);分别移取标准使用液50、100、250、500、750μL,用甲醇水(1∶1)定容1mL,配制成0.5、1、2.5、5、7.5、10ng/mL系列标准工作液。
  3.仪器测试条件
  ESI源;正模式;色谱柱:C18柱,2.1mm×100mm,1.7μm;柱温:35oC;进样量:10μL;流速0.2mL/min;梯度洗脱条件见表1。
  4.样品前处理
  称取2g(精确到0.01g)样品,置于50mL聚丙烯离心管中,准确加入25mL乙酸乙酯-环己烷(1∶1)溶液,涡旋混合提取2mim,再超声提取15min,4000r/min离心5min,過0.22μm有机膜,待净化。取10mL待净化液过PCX小柱(PCX小柱预活化:6mL甲醇、6mL水),4mL水和4mL甲醇淋洗,用8mL5%氨水甲醇洗脱,于45°C氮吹吹干,用甲醇水(1∶1)复溶,定容1mL,过0.22μm有机膜待上机。
  5.方法检出限及线性回归方程
  对配制的罗丹明B系列标准工作溶液进行测试,线性回归方程、相关系数及方法检出限(按S/N=3计)见表2。实验结果表明罗丹明B在0-10ng/mL范围内线性良好,相关系数为0.999。
  6.回收率与精密度
  在不含罗丹明B的调料中,分别添加含量为5、10、25μg/kg三个浓度水平的标样,每个水平平行测定6次,其回收率和相对标准偏差(RSD)见表3。
  7.结论
  罗丹明B采用外标法定量。实验结果表明,罗丹明B在0-10ng/mL范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.999,方法检出限为0.001μg/kg,该目标化合物的平均添加回收率为80.45%-117.57%,RSD均小于5.0%。本方法具有前处理简单、快速、结果准确可靠等优点,可用于调料中非法添加物罗丹明B的检测。
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