【摘 要】
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目的：构建和转化人α-防御素HNP-1成熟肽的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究其相互作用蛋白分子打下基础。方法：用RT-PCR扩增HNP-1成熟肽基因,将该基因片断与腺病毒载体p
【机 构】
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四川大学华西医学中心感染与免疫教研室,四川大学华西医院麻醉科
【基金项目】
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CMB基金（98-681）,自然科学基金（30470763,30671963）资助.
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目的：构建和转化人α-防御素HNP-1成熟肽的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究其相互作用蛋白分子打下基础。方法：用RT-PCR扩增HNP-1成熟肽基因,将该基因片断与腺病毒载体pBluescript-SK-Ⅱ定向重组;用酶切和测序鉴定重组质粒;回收目的片断,将其连接入酵母表达载体pGBKT7,构建重组诱饵表达质粒pGBKT7-HNP-1,测序鉴定。缺陷培养方法检测重组诱饵载体有无毒性和自激活作用。结果序列分析表明HNP-1成熟肽重组诱饵表达质粒构建成功,重组诱饵表达质粒对酵母细胞无毒性作用,无自激活
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