人FRNK重组腺病毒的构建

来源 :武汉大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:FUHENGBIN
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目的:应用AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统构建人FRNK基因重组腺病毒,并在HEK293细胞中扩增制备重组病毒。方法:把人FRNK基因克隆人腺病毒穿梭载体pAdTrack—CMV中,构建腺病毒质粒pAdTrack-CMV-hFRNK,经Pme Ⅰ内切酶酶切成线性化后,采用电穿孔转化将其转化到含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的感受态大肠杆菌BJ5183中,通过卡那霉素筛选获得阳性腺病毒重组质粒。再将获得的腺病毒重组质粒转染到HEK293细胞进行包装,获得人FRNK重组腺病毒pAdhFRNK。荧光显微
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