平菇疏水蛋白Po.hyd基因RNAi载体构建及转化

来源 :食品科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mathsboy

【摘要】

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为研究平菇疏水蛋白基因Po.hyd的功能,首次构建了Po.hyd的RNAi载体,并通过根癌农杆菌介导获得了平菇转化子.通过聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）扩增Po.hyd序列

【作者】

：

刘媛媛马爱民

【机构】

：

华中农业大学食品科学技术学院

【出处】

：

食品科学

【发表日期】

：

2016年11期

【关键词】

：

糙皮侧耳疏水蛋白 RNAI 根癌农杆菌介导 Pleurotus ostreatushydrophobinRNAiAgrobacterium tumefacie

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为研究平菇疏水蛋白基因Po.hyd的功能,首次构建了Po.hyd的RNAi载体,并通过根癌农杆菌介导获得了平菇转化子.通过聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）扩增Po.hyd序列,利用Golden Gate克隆法构建了干扰载体p1302-GG-ihyd,将其导入根癌农杆菌GV3101中,并在乙酰丁香酮的诱导下完成根癌农杆菌对平菇幼嫩菌丝的介导转化.转化子经PCR检测、荧光显微镜观察、实时定量荧光PCR技术（real-time PCR）以及Southern杂交等技术进

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