反相高效液相色谱柱前衍生荧光法测定肠粘膜中的谷氨酰胺

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以邻苯二甲醛及3-巯基丙酸为衍生试剂,50mmol/L磷酸缓冲液(pH7.0)-乙腈(94∶6,V/V)为流动相,在LichrosorbRP18(150mm×4.6mmi.d.,5μm)柱上,研究并建立了测定动物肠粘膜中谷氨酰胺(Gln)的柱前衍生荧光RP-HPLC法。样品与衍生剂按4∶1进行衍生反应,Ex=230nm,Em=389nm;流速为2.0mL/min。Gln的保留时间为3.158min,检测限为25μmol/L(S/N=3.5),线性范围为50~3200μmol/L,r=0.9996,日间精密度RSD值均不大于6.97%。对SD大鼠肠粘膜屏障损伤防治中有关Gln的指标进行了测定,证明方法具有快速、灵敏及简便等特点。 Using phthalaldehyde and 3-mercaptopropionic acid as the derivatization reagent, 50mmol / L phosphate buffer (pH7.0) -acetonitrile (94: 6, V / V) was used as the mobile phase in Lichrosorb RP18 (150mm × 4.6mm. d., 5μm) column, to study and establish a pre-column fluorescence quantitative RP-HPLC method for the determination of glutamine (Gln) in the intestinal mucosa of animals. The sample was derivatized with derivatizing reagent at 4: 1, Ex = 230 nm, Em = 389 nm; flow rate was 2.0 mL / min. The retention time of Gln was 3.158min, the detection limit was 25μmol / L (S / N = 3.5), the linear range was 50 ~ 3200μmol / L, r = 0.9996, .97%. The indicators of Gln in the prevention and treatment of intestinal mucosal barrier injury in SD rats were determined, which proved that the method was rapid, sensitive and simple.
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