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目的:克隆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)cDNA并构建含t-PA基因的腺病毒表达 载休划硫氰酸胍;-酚-氢仿一步法从Bowes黑色素瘤细胞中提取总RNA,并经反转录PCR获得t-PAcDNA。将质粒pUC19双酶切并纯化回收大片段,与纯化后的PCR产物连接构成pUC19t-PA,转化大肠肝菌JM109,挑选白色克隆作酶切鉴定、测序,pUC19t-PA及腺病毒载体pAdMV(6.67kb)分别双酶切前者回收1