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呼吸道合胞病毒(RSV)是婴幼儿时期急性下呼吸道感染最主要的病原体[1].近年发展起来的实时聚合酶链反应技术具有灵敏度高、特异性好、方法简便等特点,广泛应用于病原体的检测[2].为此,我们设计并建立了用SYBR GreenⅠ实时逆转录PCR结合融解曲线分析快速鉴别呼吸道合胞病毒A、B亚型的方法。
实时逆转录聚合酶链反应快速鉴别呼吸道合胞病毒亚型
【摘 要】
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呼吸道合胞病毒(RSV)是婴幼儿时期急性下呼吸道感染最主要的病原体[1].近年发展起来的实时聚合酶链反应技术具有灵敏度高、特异性好、方法简便等特点,广泛应用于病原体的检测[2].为此,我们设计并建立了用SYBR GreenⅠ实时逆转录PCR结合融解曲线分析快速鉴别呼吸道合胞病毒A、B亚型的方法。
【机 构】
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325027,温州医学院附属第二医院检验科,325027,温州医学院附属第二医院检验科,丽水市人民医院检验科,325027,温州医学院附属第二医院检验科,温州医学院检验医学院/细胞与分子医学研究所
【发表日期】
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2005年28期
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答：该技术是根据蛋白质等电点和分子量的差异，连续进行成垂直方向的两次电泳将其分离。第一向为等电聚焦（Isoelectric facusing，IEF）电泳，其基本原理是利用蛋白质分子的等电点不同进行蛋白质的分离。第二向为十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE），它是按蛋白质分子量的大小进行分离。
问:如何书写基因符号? 答:用于出版物的基因符号建议在基因和等位基因符号下加下划线,印在正式文稿中用斜体;蛋白质符号应该用标准字体表示.在基因目录中则不必用斜体字.为区分mRNA、基因组DNA和cDNA,应该在括号内注明相应的前缀,例如:(mRNA)RBP1,(gDNA)RBP1,(cDNA)RBP1.
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所谓"即刻性"质控法实质上是将数据处理过程中对异常值(即离群值)的判断及舍弃的方法用于室内质控, 由于它只要测定3～4次后即可提供检测过程有无失控的信息,故称之"即刻性"质控。
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由中国实验室国家认可委员会主持召开的"全国ISO15189认可研讨会暨解放军总医院临床检验科通过国家认可颁证挂牌仪式"2005年8月30日在解放军总医院举行.解放军总医院临床检验科是国内首家通过ISO15189认可并颁证挂牌的临床实验室.国家认证认可监督委员会程方副主任、刘安平司长,中国实验室国家认可委员会魏昊秘书长到会讲话.来自全国20多个省市的150多名检验科主任出席了研讨会。
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目的 探讨基因芯片技术在进行北方汉族人群人白细胞抗原B位点(HLA-B)分辨度分型的价值.方法根据中国北方汉族人群HLA-B常见基因位点及临床分型分辨度特征,设计特异性寡核苷酸中分辨度分型探针,制成HLA-B基因分型芯片.采用荧光标记引物和不对称聚合酶链反应(PCR)扩增HLA-B 2、3外显子,产物与芯片探针杂交后经荧光扫描,并用特定软件分析判断阳性探针,以确定样品基因型.结果用中分辨度探针从3
透明质酸(hyaluronic acid,HA)是肝脏细胞外间质中蛋白多糖的一个组成部分.由肝内间质细胞合成,内皮细胞参与降解.其血清含量对判明肝脏纤维程度,判别有无肝硬化具有一定意义[1].HA目前检测方法主要是放射免疫法(RIA),由于受标记物的稳定性、测量范围、放射性污染等因素的影响,存在一定的局限性.目前国内外尚无运用时间分辨免疫分析技术(TRFIA)检测HA的报道,为此经过探索和研究,我
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经多年来的分子生物学实验证实尿苷酶(UDG)是当前抗污染非常有效的试剂,在国家批准的体外诊断试剂中应用UDG抗污染已程序化.随着分子生物学学科发展,聚合酶链反应已在多学科的多项研究中推广和应用,而其预防污染和抗污染研究工作依然极其重要.2000年我所曾对聚合酶链反应污染环节进行详细的分析和研究[1]。
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临床确诊化脓性脑膜炎(化脓)主要依赖脑脊液细菌培养,但其耗时较长,阳性率低,难以适应临床早期诊断.为此,我们对疑似化脑患儿行脑脊液细菌DNA荧光定量及芯片杂交检测,并进行脑脊液细菌培养对照,效果较好。
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