寡霉素对白血病K562/A02细胞株凋亡调控机制探讨

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目的寡霉素是一种线粒体F0F1-ATP酶抑制剂,能抑制细胞内能量的产生。目前尚无寡霉素对白血病多药耐药细胞株K562/A02作用的报道。本研究旨在探讨线粒体靶向药物寡霉素对白血病多药耐药细胞株K562/A02的体外促凋亡作用。方法四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazoyl tetrazolium,MTT)法进行寡霉素的细胞生长抑制试验。流式细胞术检测寡霉素作用后早期细胞凋亡率,线粒体膜电位的变化及细胞内活化Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的水平。结果寡霉素对K562/A02和K562细胞具有生长抑制作用,且具有浓度依赖性,IC50值分别为(11.24±1.27)μg/mL和(42.66±3.39)μg/mL,K562/A02对寡霉素的敏感性高于K562细胞,差异有统计学意义,t=15.03,P<0.01。寡霉素可诱导细胞的凋亡,25μg/mL寡霉素作用24h后K562/A02和K562细胞的早期凋亡率分别为(8.20±0.48)%和(3.28±0.37)%,差异有统计学意,t=14.06,P<0.01。25μg/mL寡霉素作用24h后K562/A02和K562细胞均出现线粒体膜电位的下降,分布在去极化区域细胞的比例分别为(17.08±2.63)%和(8.75±1.96)%,差异有统计学意义,t=4.40,P=0.01。25μg/mL寡霉素作用24h后K562/A02和K562细胞内活化Caspase-3的水平分别为94.21±7.27和46.76±5.71,均高于对照组的2.87±0.86,差异均有统计学意义,t值分别21.61和13.16,均P<0.01。K562/A02和K562细胞内活化Caspase-9水平分别为67.89±5.78和40.24±4.56,均高于对照组的3.07±0.39,差异均有统计学意义,t值分别为19.38和14.07,均P<0.01。而寡霉素作用后K562/A02和K562细胞内活化Caspase-8的水平分别为2.56±0.45和2.17±0.45,与对照组(2.38±0.79)比较差异无统计学意义,t值分别为0.34和0.40,均P>0.05。结论寡霉素通过线粒体途径诱导K562/A02细胞的凋亡。
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