纤维连接蛋白HepⅡ功能域作用于体外培养的人眼小梁细胞的研究

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目的 探讨纤维连接蛋白Hep Ⅱ功能域对体外培养的人眼小梁细胞的作用.方法 对照实验研究.在体外培养的人眼小梁细胞中加入纤维连接蛋白HepⅡ功能域片段,孵育18、24 h,通过光镜与电镜观察小梁细胞的形态学变化,同时应用免疫荧光染色观察纤维连接蛋白HepⅡ功能域对体外培养的人眼小梁细胞肌动蛋白、纽蛋白、β-连接蛋白的影响.结果 加入纤维连接蛋白HepⅡ功能域片段10~24 h,光镜下观察,可见小梁细胞逐渐发生形态学变化,表现为细胞收缩、变圆、彼此间分离;激光共聚焦显微镜下观察,呈红色细丝状着染的小梁细胞肌动蛋白染色减少;位于肌动蛋白两端绿色点、簇状着染的Vinculin染色明显减少;β-Catenin免疫荧光染色呈绿色点状,在沿细胞相连的胞膜处分布减少.电镜下观察,可见小梁细胞突起间缝隙增宽.加入纤维连接蛋白Hep Ⅱ功能域片段24 h,小梁细胞恢复至加入Hep Ⅱ功能域片段前的状态.结论 纤维连接蛋白Hep Ⅱ功能域能够可逆性的阻断人眼小梁细胞肌动蛋白及其细胞连接.通过信号转导并重组细胞骨架肌动蛋白及其细胞连接有可能成为重要的研究方向。

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