含HIV-1Tat基因重组反转录病毒表达载体构建与表达Tat蛋白功能检测

来源 :南京医科大学学报：英文版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：michaelgang1

【摘要】

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目的:构建含HIV-1 Tat基因重组反转录病毒表达载体及评价表达Tat蛋白的功能.方法:使用HindⅢ将HIV-1 Tat1101蛋白编码基因从pEV质粒中切出,插入到表达质粒LZRSpBMN-Z中,构建

【作者】

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卢春钱超唐桂霞黄丽曾怡

【机构】

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南京医科大学微生物学与免疫学系

【出处】

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南京医科大学学报：英文版

【发表日期】

：

2003年6期

【关键词】

：

HIV-1 TAT基因基因重组反转录病毒表达载体磷酸钙转染法免疫组织化学 HIV-1 tat retroviral expression vector

【基金项目】

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国家自然科学基金

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目的:构建含HIV-1 Tat基因重组反转录病毒表达载体及评价表达Tat蛋白的功能.方法:使用HindⅢ将HIV-1 Tat1101蛋白编码基因从pEV质粒中切出,插入到表达质粒LZRSpBMN-Z中,构建成重组反转录病毒表达质粒LZRS-Tat101.采用磷酸钙转染法将重组质粒LZRS-Tat101转染进含反转录病毒env、gal和pol编码基因的包装细胞phoenix(ФNX)中,嘌呤霉素筛选获得稳定细胞系.免疫组化(IHC)染色检查Tat在临时转染和稳定转染ФNX细胞中的表达水平.收集临时转染和稳定

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