【摘 要】
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目的：探讨金荞麦对人结直肠癌HCT-116细胞增殖、凋亡及自噬的影响，明确其可能的作用机制。方法：采用细胞增殖与活性检测（CCK8）法检测细胞活性，计算半数抑制率(IC50)；设置空白组、金荞麦组(2、4、8 mg·L-1)共四个处理，采用克隆形成实验观察金荞麦对HCT-116细胞增殖的影响；用流式细胞术检测金荞麦对细胞凋亡的影响；蛋白免疫印迹法（Wester blot）检测自噬相关蛋白；West
【机 构】
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成都大学临床医学院/附属医院基础医学院食品与生物工程学院
【基金项目】
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四川省中医药管理局科研专项课题（2021MS189）； 成都市金牛区医学会科研课题（JNKY2021-06）； 食品加工与应用四川省高校重点实验室科研项目（17-F-04）； 成都大学附属医院院级课题（Y202232，T202234）； 成都市医学
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目的：探讨金荞麦对人结直肠癌HCT-116细胞增殖、凋亡及自噬的影响，明确其可能的作用机制。方法：采用细胞增殖与活性检测（CCK8）法检测细胞活性，计算半数抑制率(IC50)；设置空白组、金荞麦组(2、4、8 mg·L-1)共四个处理，采用克隆形成实验观察金荞麦对HCT-116细胞增殖的影响；用流式细胞术检测金荞麦对细胞凋亡的影响；蛋白免疫印迹法（Wester blot）检测自噬相关蛋白；Wester blot检测p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）、细胞外信号调节激酶（ERK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）、磷酸化（p）-p38、p-ERK、p-JNK等蛋白的表达；最后，流式细胞仪和荧光显微镜分析活性氧（ROS）的变化，并用活性氧清除剂（NAC）进行验证。结果：与空白组相比，金荞麦组HCT-116细胞活性明显降低（P＜0.05，P＜0.01）；与空白组相比，金荞麦组HCT-116细胞凋亡率明显升高（P＜0.01），且具有统计学意义；相比于空白组，自噬相关蛋白泛素结合蛋白（p62）表达降低，自噬特异性基因（Beclin1）、自噬微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）表达增强，且具有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）。与金荞麦组比较，金荞麦+NAC组细胞凋亡率明显降低（P＜0.01），相关自噬蛋白Beclin1表达显著降低（P＜0.01）、LC3B蛋白表达降低（P＜0.01）。最后通过Wester blot检测到金荞麦处理后的有丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路相关蛋白ERK、JNK表达降低（P＜0.05，P＜0.01），p-ERK、p-JNK表达增强（P＜0.05，P＜0.01）。结论：金荞麦可抑制HCT-116细胞增殖，诱导细胞凋亡及自噬，作用机制与ROS/MAPK信号通路途径有关。
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