哈维氏弧茵胞外蛋白酶基因的克隆表达及免疫原性

来源 :水生生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：blowywang

【摘要】

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根据实验室分离的大黄鱼弧菌病主要病原菌哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)GYC1108-1株的胞外蛋白酶基因序列,设计胞外蛋白酶基因(△ProA)特异性引物,扩增获得1552 bp的△ProA基因

【作者】

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潘晓艺沈锦玉余旭平许文军曹铮尹文林郝贵杰

【机构】

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浙江大学,杭州,310029浙江省淡水水产研究所,湖州,313001;浙江省淡水水产研究所,湖州,313001;浙江大学,杭州,310029;浙江省海洋水产研究所,舟山,316100;

【出处】

：

水生生物学报

【发表日期】

：

2010年1期

【关键词】

：

哈维氏弧菌胞外蛋白酶原核表达包涵体大黄鱼

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根据实验室分离的大黄鱼弧菌病主要病原菌哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)GYC1108-1株的胞外蛋白酶基因序列,设计胞外蛋白酶基因(△ProA)特异性引物,扩增获得1552 bp的△ProA基因,克隆于pUC57-T载体;将△ProA基因亚克隆到原核表达载体pET-28a进行融合表达,SDS-PAGE电泳检测发现,△ProA融合蛋白经IPTG诱导后在大肠杆菌中以包涵体形式表达,分子量大小约55 kD,诱导5h的表达蛋白产量约占细菌总蛋白的21%.Western blot分析,表达的55 kD蛋白具有较高免疫原性.用纯化的△ProA融合蛋白对大黄鱼进行免疫试验,结果免疫保护率达到75%.

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