白花蛇舌草多糖诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡及其机制研究

来源 :中华血液学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:haibei007
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目的 研究白花蛇舌草多糖(PEHD)对多发性骨髓瘤(MM)细胞增殖的影响,为其应用于临床治疗MM提供实验依据.方法 以MM细胞株RPMI 8226为研究对象.MTT法检测PEHD对RPMI 8226细胞增殖的影响.Annexin V-FITC/碘化丙锭(PI)双染法(Annexin V/PI)标记的流式细胞术检测PEHD诱导RPMI 8226细胞凋亡情况.Hoechst 33258染色法观察PEHD诱导RPMI 8226细胞凋亡的形态学改变.用Western blot检测PEHD处理后有关凋亡信号传导通路蛋白caspase-3、-8、-9和PARP蛋白的表达以及PEHD作用前后NF-κB蛋白以及其他通路蛋白的变化情况.结果 PEHD在一定浓度范围内对RPMI 8226细胞有明显的增殖抑制作用,最高抑制率达到了92.3%,在1~4 mg/ml浓度范围内呈时间-剂量依赖性.不同浓度PEHD分别作用24 h,RPMI 8226细胞均可见凋亡小体,且凋亡小体数量随PEHD浓度增加而增加.1、2、3 mg/ml PEHD诱导的细胞早期凋亡率分别为22.52%、62.31%、69.94%,高于空白对照组8.93%.1、2、3 mg/ml PEHD作用24 h,RPMI 8226细胞caspase 8、9、3和PARP蛋白表达上升,Mcl-1、Bcl-xl、Bid、Bim的表达随着PEHD浓度的增加而下降,而Bax、Bak、Bad表达上升,但p-AKT蛋白(相对分子质量60 000)的表达明显下降,NF-κB蛋白表达水平明显下调.结论 在一定浓度范围内的PEHD(1 ~4 mg/ml)可明显抑制RPMI 8226细胞增殖,呈时间和浓度依赖性;其增殖抑制作用与诱导细胞凋亡有关;诱导细胞凋亡机制与其激活caspase-8、-9、-3及PARP蛋白表达,下调p-AKT及NF-κB蛋白表达有关。

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