人重组胱天蛋白酶原—3的表达和体外活化

来源 :北京大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yifengwuyang
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目的:建立一个在短时间内获取大量活化胱天蛋白酶-3的方法。方法:将胱天蛋白酶-3酶原的基因从真核表达载体中克隆到原核表达载体pMTY4-His中,在大肠杆菌中以包涵体的形式表达MS2-胱天蛋白酶原-3融合蛋白;将包涵体变性,经酸化和浓缩进行体外活化;对所得蛋白用Western blot和活性试验进行鉴定。结果:构建成pTMY4-His-胱天蛋白酶-3原核表达载体,在大肠杆菌中获得了较高水平表达的胱天蛋白酶原-3酶原-MS2融合蛋白。体外活化后每升诱导菌可获得约10mg蛋白,用抗胱天蛋白酶-3单克隆抗体证实
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