【摘 要】
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目的:制备过敏原诊断用膜芯片并优化其实验条件,探讨其在过敏性疾病诊断中的应用价值。方法:以虾、蟹、鳖、大豆等过敏原按一定点阵排列吸附在不同膜载体(NC膜、PVDF膜)上,制
【机 构】
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惠州学院生命科学系,惠州市中心人民医院,
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目的:制备过敏原诊断用膜芯片并优化其实验条件,探讨其在过敏性疾病诊断中的应用价值。方法:以虾、蟹、鳖、大豆等过敏原按一定点阵排列吸附在不同膜载体(NC膜、PVDF膜)上,制作含有阳性对照和阴性对照的膜芯片,用斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)从包被液、过敏原包被浓度、二抗浓度等方面优化工作条件,并与德国Allergop-harma的过敏原检测试剂盒比较结果符合度。将包被好的PVDF膜保存在4℃冰箱中在3个月内检测其稳定性。结果:PVDF膜的效果优于NC膜,肉眼观察膜上斑点的显色即可确定相应过敏原,以试剂盒检出的阳性血清28份作比较,结果总符合率达82.1%(23/28),差异无统计学意义(P>0.05)。不同时间同批试剂重复检测结果完全一致,制备的过敏原膜芯片在4℃密封避光可稳定保存3个月。结论:建立的Dot-ELISA法膜芯片能同时检测多种过敏原,具有用血量少,成本低,操作简便,安全特异等优点,值得临床推广应用。
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