RT—PCR和nested—PCR技术在猪瘟病毒检测中的应用

来源 :甘肃畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xuming

【摘要】

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根据已发表的CSFV核苷酸序列,设计并合成CSFV特异性PCR引物对及nested-PCR引物对.从待检猪脾脏、淋巴组织或实验感染的细胞培养物中提取总RNA,用AMV反转录酶进行反转录后,进

【作者】

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胡建和王天有刘保国李培庆刘湘涛谢庆阁

【机构】

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中国农业科学院兰州兽医研究所,河南职业技术师范学院动物科学系

【出处】

：

甘肃畜牧兽医

【发表日期】

：

2003年1期

【关键词】

：

RT-PCR nested-PCR技术猪瘟病毒检测应用同源性比较

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根据已发表的CSFV核苷酸序列,设计并合成CSFV特异性PCR引物对及nested-PCR引物对.从待检猪脾脏、淋巴组织或实验感染的细胞培养物中提取总RNA,用AMV反转录酶进行反转录后,进行PCR扩增,一扩产物再用nested-PCR引物对进行二次扩增,用琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物.进一步将该片段纯化回收后,克隆到T载体并进行测序.测序结果同已知的CSFV、BVDV和BDV核苷酸序列进行同源性比较分析,既可快速、准确地区别于BVDV和BDV,又可以确定CSFV的血清型.该方法可有效用于猪瘟的病理学和流行

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