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利用原核表达德氏乳杆菌保加利亚亚种atpA抗原并进行抗体制备,以便用于Westemblot分析。首先利用PCR的方法扩增出atpA蛋白的基因片段,利用大肠杆菌pQE40原核表达系统表达重组atpA抗原,镍柱亲和层析纯化表达蛋白后,常规免疫两只新西兰长耳白兔。利用ELISA检测兔血清的效价来制备多克隆抗体,然后用ProteinA纯化抗体。最后得到的atpA抗体进行westemblot检测验证抗体的特异性。结果表明,两只新西兰长耳白兔的血清效价分别为1:20000和1:80000;Westemblot检测表明