【摘 要】
：
目的:构建靶向肿瘤坏死因子α（TNF-α）基因的小干扰RNA（siRNA）真核表达载体,观察其对人肺腺癌A549细胞中TNF-α和转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响。方法:依据GenBank中人TNF-
【机 构】
：
郑州大学第一附属医院呼吸内科,郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室
论文部分内容阅读
目的:构建靶向肿瘤坏死因子α（TNF-α）基因的小干扰RNA（siRNA）真核表达载体,观察其对人肺腺癌A549细胞中TNF-α和转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响。方法:依据GenBank中人TNF-α（NM000594）序列和siRNA靶序列设计原则,设计并合成一对针对TNF-α的特异性序列（siTNF-α）和一对无关序列（siCon）。退火合成DNA双链,再分别重组入pRNAT-U6.1载体,经过PCR和DNA测序鉴定。将构建好的重组载体pRNAT-U6.1-siTNF-α、pRNAT-U6.1-siCon及空载体pRNAT-U6.1用脂质体介导转染A549细胞株,分别采用RealtimePCR和Westernblot方法检测细胞中TNF-α和TGF-β1mRNA和蛋白的表达水平。结果:PCR和DNA测序鉴定证实载体构建成功;转染pRNAT-U6.1-siTNF-α的A549细胞中TNF-α和TGF-β1mRNA和蛋白表达水平均低于其他3组（FmRNA=478.663,4.081;F蛋白=123.420,6.312,P均<0.05）。结论:成功构建了靶向TNF-α基因的siRNA真核表达载体,该载体能够有效沉默A549细胞中TNF-α的表达,TGF-β1基因表达亦受到抑制。
其他文献
伸缩缝的作用在于调节桥梁的位移和转动,是桥梁施工的重要工序,施工质量将直接影响到公路桥梁的使用寿命。以滨州黄河大桥伸缩缝为例,先分析桥梁伸缩缝施工的基本要求和影响
<正>脑室出血是高血压患者脑壳核的出血经脑尾状核与内囊的薄弱三角处破入脑室系统,大量的脑室出血并铸形破坏极大,原因是出血堵塞了脑脊液循环通道,造成脑内压急剧升高,短时
当代中国农民面临着制度歧视、市场失灵和政府失灵的三重困境;现行的乡镇体制强化了行政权力,使政府职能越位、错位和失位并存;尊重和保障农民的人权,促进每个农民自由而全面
目的制备EphrinA1-PE38/GM-CSF壳聚糖纳米颗粒系统,检测其物理性能。方法制备EphrinA1-PE38/GM-CSF壳聚糖纳米颗粒系统并检测颗粒大小、形态、包装容量、包装效率、稳定性、
本文运用多种非参数检验及方差分析方法,结合问卷调查数据及上市公司公开数据,研究了我国企业负债期限结构决策的影响因素。研究发现短期债务的易获得性及低成本是我国企业决
多媒体网络教学是计算机多媒体技术、网络通信技术与现代教育理论相结合的产物。在多媒体网络教学发展已初具规模的今天,需要对其系统、教师、学生、教材、教学媒体及教学形
[目的]通过观察知柏地黄汤对解脲支原体(UU)感染大鼠精液常规各项指标及生精细胞凋亡因子Cyt-c、AIF表达的影响,探讨UU感染导致不育症的病理机制及知柏地黄汤的干预作用。[方
区域创新政策在提升区域创新能力，进而影响地区乃至国家综合竞争力上起到关键的作用，其覆盖面广泛，从对基础研究的直接支持到改进公司创新能力的更加直接的方法，以促进创新和技术
在中国传统民居中，福建民居由于其气候条件、地理位置等因素的影响，具有独特的地域风格。城市中的福建传统民居虽有大部分没有保存下来，但在现今的福建乡村地区，仍沿袭福建传统民
目的:探讨香菇多糖对肝癌患者经导管肝动脉栓塞化疗术后血浆内毒素及血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响。方法:肝癌患者106例,随机分成对照组和观察组,各53例。对照组:给予经