【摘 要】
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目的建立一种高通量、快速、准确甄别3、7、14、11和55型腺病毒的化学发光基因芯片方法。方法从GenBank中查找这5种腺病毒特异性基因保守区,设计分型的探针并在筛选后进行合
【机 构】
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河北北方学院,军事医学科学院放射与辐射医学研究所,解放军309医院,
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目的建立一种高通量、快速、准确甄别3、7、14、11和55型腺病毒的化学发光基因芯片方法。方法从GenBank中查找这5种腺病毒特异性基因保守区,设计分型的探针并在筛选后进行合成,用于制备寡核苷酸基因芯片。运用多重不对称PCR法扩增特异性基因片段,将扩增产物与基因芯片上的特异性探针杂交,经过洗涤、化学发光显色后,进行结果分析。在优化的多重PCR体系、杂交条件和化学发光检测条件下,对芯片的特异性、灵敏性和重复性进行评价。结果建立的基因芯片方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,检测质粒参考品最低检测限为3×10~3拷贝/反应,38例临床样本的分型结果与测序法结果基本一致(37/38)。结论建立了一种能快速、灵敏、特异区分5种腺病毒型别的基因芯片分型方法,为腺病毒分型提供一种新的检测手段。
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