P100蛋白及其片段重组质粒构建与表达

来源 :医学分子生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jh_viso1

【摘要】

：

目的分别将人类p100基因，p100的SN基因片段和TD片段定向连入pERFP-CI质粒，使它们可与红色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达，从而为进一步研究P100蛋白及其片段的定位、功能及与其它

【作者】

：

陆燕欣李晓冬何津著葛林杨洁

【机构】

：

天津医科大学免疫学教研室天津市细胞与分子免疫学重点实验室

【出处】

：

医学分子生物学杂志

【发表日期】

：

2009年3期

【关键词】

：

人类P100蛋白重组质粒融合蛋白蓝白斑筛选 Human P100 protein Recombinant plasmid fusion protein

【基金项目】

：

国家高技术研究发展计划（863计划）（No.2007AA02Z115）,国家教育部新世纪人才支持计划（No.NCET-04-0245）,国家自然科学基金（No.30670441,30300070）,天津市科委应用基础研究重点项目（N0.07JCZDJC07300）,天津市科委国际合作项目（No.05YFGHHZ01300）.

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目的分别将人类p100基因，p100的SN基因片段和TD片段定向连入pERFP-CI质粒，使它们可与红色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达，从而为进一步研究P100蛋白及其片段的定位、功能及与其它蛋白的相互关系奠定实验基础。方法PCR分别扩增出P100蛋白全长，SN片段和TD片段基因的序列，定向克隆至真核表达载体pERFP-CI，构建相应的3种重组质粒。将构建成功的质粒转染入HeLa细胞，荧光显微镜下可观察红色荧光融合蛋白表达。结果①PCR法获得P100基因序列，长度为2659bp，SN基因片段1918bp

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