【摘 要】
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根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,设计了1对特异性引物和1条TaqMan(R)探针,建立了一步法检测PRRSV的荧光定量RT-PCR方法.结果表明,建立的方法具有较高的特异性,与PC
【机 构】
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浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江省海盐县畜牧兽医局
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根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,设计了1对特异性引物和1条TaqMan(R)探针,建立了一步法检测PRRSV的荧光定量RT-PCR方法.结果表明,建立的方法具有较高的特异性,与PCV,JEV,SFV,PRV,PPV无交叉反应；可以检测到10个拷贝数的模板RNA或1个TCID50的PRRSV,比常规RT-PCR方法的灵敏度高10倍；对同一样品进行4次重复试验,变异系数(CV)＜1％,具有较好的重复性.应用建立的荧光定量RT-PCR和常规RT-PCR对72份PRRS疑似病例肺组织进行平行检测,结果荧光定量RT-PCR检出40份阳性,高于常规RT-PCR方法(28份阳性).建立的荧光定量RT-PCR方法特异性好、灵敏度高,而且快速简便,可用于PRRSV的实验室快速诊断和流行病学调查.
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