【摘 要】
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目的探索并建立带状疱疹减毒活疫苗免疫大鼠脾细胞的体外IFN-γ释放检测方法 ,并建立评价带状疱疹疫苗免疫应答的检测平台。方法取雌性SD大鼠免疫后4、6、8、12周的血清及脾
【机 构】
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沈阳药科大学生物技术与生物制药教研室,北京万泰生物药业股份有限公司研发中心,沈阳化工研究院安全评价中心免疫教研室,
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目的探索并建立带状疱疹减毒活疫苗免疫大鼠脾细胞的体外IFN-γ释放检测方法 ,并建立评价带状疱疹疫苗免疫应答的检测平台。方法取雌性SD大鼠免疫后4、6、8、12周的血清及脾细胞,分别用gp-ELISA法定量检测血清IgG水平,用双抗体夹心ELISA法定量检测脾细胞体外IFN-γ释放水平,用SPSS 16.0软件分析检测数据。结果大鼠IFN-γ释放受到脾细胞数、培养时间、刺激物种类的影响,脾细胞数为1×107个/ml、用带状疱疹疫苗刺激6 d的IFN-γ释放量[(6 617±1.33)pg/ml]达到峰值,协同刺激因子可加速脾细胞体外IFN-γ释放速度,刺激2 d后IFN-γ释放量[(6 016±1.46)pg/ml]达到峰值,与疫苗单独刺激组6 d的峰值水平一致。大鼠免疫后血清IgG水平与脾细胞释放的IFN-γ水平随带状疱疹疫苗免疫次数增加的变化趋势一致,皆于第2次免疫后达到峰值期。结论通过对影响带状疱疹疫苗免疫大鼠脾细胞体外IFN-γ释放因素的研究,建立了大鼠脾细胞体外IFN-γ释放检测平台,且发现协同刺激因子可加速而不额外增加脾细胞体外IFN-γ释放量,为快速检测大鼠脾细胞体外IFN-γ释放量提供了方法;同时验证了gp-ELISA检测的IgG与双抗体夹心检测的IFN-γ具有一致性。
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