【摘 要】
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目的探讨miR-506对结肠癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法将结肠癌细胞SW620随机分为四组,分别转染pc DNA3空载体(pc DNA3组)、miR-506过表达质粒pc DNA3/pri-506(miR-506
【机 构】
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天津医科大学一中心临床学院,天津市第一中心医院
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目的探讨miR-506对结肠癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法将结肠癌细胞SW620随机分为四组,分别转染pc DNA3空载体(pc DNA3组)、miR-506过表达质粒pc DNA3/pri-506(miR-506组)、p SIH1空载体(p SIH1组)及miR-506抑制表达质粒p SIH1/Tu D-506(Tu D-506组)。采用qRT-PCR法检测各组miR-506 mRNA的相对表达量,CCK-8法检测各组的细胞活性,集落形成试验检测各组的集落形成能力。采用生物信息学软件预测miR-506的潜在靶基因,荧光报告载体试验验证结肠癌细胞SW620中miR-506对靶基因mRNA的调控作用。采用qRT-PCR法和Western blotting法检测miR-506对靶基因mRNA及其蛋白表达的影响。结果与pc DNA3组比较,miR-506组miR-506 mRNA的相对表达量明显升高,而细胞活性、集落形成能力明显减弱(P均<0.01);Tu D-506组与p SIH1组miR-506 mRNA的相对表达量、细胞活性、集落形成能力比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。生物信息学软件预测发现,层黏连蛋白γ1(LAMC1)是miR-506的潜在靶基因,经荧光报告载体试验验证,miR-506能够直接作用于LAMC1 mRNA并负性调控其表达。miR-506组LAMC1 mRNA及其蛋白的相对表达量均低于pc DNA3组(P均<0.05),Tu D-506组与p SIH1组LAMC1 mRNA及其蛋白的相对表达量比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 miR-506可抑制结肠癌的细胞活性、集落形成能力,LAMC1可能是miR-506的直接靶基因;miR-506可能通过抑制LAMC1的表达而抑制结肠癌细胞增殖。
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