探讨人参炔醇对胰腺癌干细胞增殖及自我更新的影响。
方法胰腺癌PANC1细胞在干细胞体系培养液中培养成干细胞,用流式细胞术检测胰腺癌干细胞的CD133+细胞比例。以72、144、287 nmol/L人参炔醇处理干细胞12、24、48 h,采用CCK8法检测细胞成活率;通过克隆形成实验观察287 nmol/L人参炔醇处理胰腺癌干细胞48 h后的集落数量;采用蛋白质印迹法检测细胞增殖相关蛋白Ki67、PCNA及自我更新相关蛋白β-catenin的表达。
结果经干细胞培养体系培养的胰腺癌PANC1细胞的CD133+细胞比例为(9.70±0.59)%,显著高于常规培养对照组的(2.11±0.25)%,差异有统计学意义(P<0.001)。人参炔醇呈浓度及时间依赖性减少胰腺癌干细胞的存活率,对照组及72、144、287 nmol/L人参炔醇处理48 h组细胞的存活率分别为100%、(63.32±2.37)%、(49.91±2.13)%、(41.37±2.01)%,差异有统计学意义(P<0.001);对照组及287 nmol/L人参炔醇处理48 h组细胞的集落形成数分别为(611±25)、(280±16)个,人参炔醇处理组集落形成数显著减少,差异有统计学意义(P<0.001);对照组细胞Ki67、PCNA、β-catenin表达量分别为0.376±0.012、0.772±0.026、0.219±0.018,人参炔醇处理组分别为0.183±0.010、0.453±0.009、0.148±0.006,处理组的蛋白表达量均较对照组显著下降,差异有统计学意义(P值均<0.001)。
结论人参炔醇可抑制胰腺癌PANC1干细胞的增殖及自我更新,其机制可能与下调Ki67、PCNA表达,阻断Wnt/β-catenin信号通路有关。