【摘 要】
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目的:研究西黄丸浸提液对卵巢癌SKOV3和HEY细胞线粒体能量代谢的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养卵巢癌SKOV3和HEY细胞,分别加入不同浓度(0、5、10、15、20 g·L-1)西黄丸浸提液干预SKOV3和HEY细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测西黄丸浸提液对SKOV3和HEY细胞存活率的影响;用试剂盒检测SKOV3和HEY细胞三磷酸腺苷(ATP)浓度;流式细胞术检测SKOV3和HEY
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81803979); 暨南大学国家级大学生创新创业训练计划项目(202210559067);
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目的:研究西黄丸浸提液对卵巢癌SKOV3和HEY细胞线粒体能量代谢的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养卵巢癌SKOV3和HEY细胞,分别加入不同浓度(0、5、10、15、20 g·L-1)西黄丸浸提液干预SKOV3和HEY细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测西黄丸浸提液对SKOV3和HEY细胞存活率的影响;用试剂盒检测SKOV3和HEY细胞三磷酸腺苷(ATP)浓度;流式细胞术检测SKOV3和HEY细胞活性氧(ROS)含量;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测西黄丸浸提液对SKOV3和HEY细胞线粒体相关蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(PGC-1α)、线粒体转录因子A(TFAM)、线粒体外膜转位酶20(TOMM20)及印迹抑癌基因Ras同源家族Ⅰ(ARHI)的表达;Mito-Tracker Green染色观察SKOV3和HEY细胞线粒体形态学变化。结果:与空白组比较,不同浓度西黄丸浸提液给药24,48h能明显抑制卵巢癌SKOV3和HEY细胞存活率( P<0.05,P<0.01),呈浓度依赖关系。与空白组比较,西黄丸浸提液10、15和20 g·L-1组的ATP水平显著降低 ( P<0.05,P<0.01);与西黄丸浸提液10 g·L-1和15 g·L-1组比较,西黄丸20 g·L-1组ATP浓度显著降低(P<0.05)。与空白组比较,西黄丸浸提液10、15、20 g·L-1组SKOV3和HEY细胞内ROS含量显著增加( P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性;与西黄丸浸提液10 g·L-1组比较,西黄丸浸提液20 g·L-1组ROS含量显著增加(P<0.05)。与空白组比较,不同浓度的西黄丸浸提液(10 、15、20 g·L-1)组SKOV3和HEY细胞的ARHI蛋白表达水平显著升高(P<0.01),且随着西黄丸浸提液浓度升高,ARHI蛋白表达逐渐升高;与西黄丸10 g·L-1和15 g·L-1组比较,西黄丸20 g·L-1组ARHI蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与空白组比较,不同浓度西黄丸浸提液(10、15、20 g·L-1)组SKOV3和HEY细胞的PCG1ɑ、TFAM、TOMM20蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性;与西黄丸浸提液10 g·L-1和15 g·L-1组比较,西黄丸浸提液20 g·L-1组HEY细胞TFAM、TOMM20蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与空白组比较,西黄丸浸提液20 g·L-1组SKOV3和HEY细胞Mito-Tracker 荧光强度显著降低(P<0.05)。结论:西黄丸能破坏卵巢癌SKOV3和HEY细胞线粒体功能并降低细胞能量代谢,从而抑制SKOV3和HEY细胞增殖,其机制可能是通过上调ARHI,抑制PCG1ɑ/TFAM信号轴实现的。
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