【摘 要】
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目的:探讨乳康饮及拆方含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞Hippo信号通路效应分子YAP/TAZ的作用.方法:乳康饮及拆方为疏肝理气组、益气健脾组含药血清分别与MDA-MB-231细胞共培养,Western Blot法检测各组细胞中Hippo通路关键蛋白YAP、p-YAP、TAZ、p-TAZ的表达,细胞免疫荧光分析乳康饮及拆方对YAP/TAZ蛋白细胞内核定位的影响.YAP抑制剂维替泊芬(VP)处理MDA-MB-231细胞,TUNEL实验检测细胞凋亡,Western Blot法检测VP对MDA-MB-
【机 构】
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山东中医药大学,济南250355;山东第一医科大学第二附属医院,泰安271000
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目的:探讨乳康饮及拆方含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞Hippo信号通路效应分子YAP/TAZ的作用.方法:乳康饮及拆方为疏肝理气组、益气健脾组含药血清分别与MDA-MB-231细胞共培养,Western Blot法检测各组细胞中Hippo通路关键蛋白YAP、p-YAP、TAZ、p-TAZ的表达,细胞免疫荧光分析乳康饮及拆方对YAP/TAZ蛋白细胞内核定位的影响.YAP抑制剂维替泊芬(VP)处理MDA-MB-231细胞,TUNEL实验检测细胞凋亡,Western Blot法检测VP对MDA-MB-231细胞中YAP/TAZ靶基因以及凋亡相关蛋白表达的影响.结果:与空白对照组比较,乳康饮组及疏肝理气组可下调YAP、TAZ蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01),上调p-YAP127S、p-YAP 397P、p-TAZ的表达(P＜0.05).免疫荧光检测乳康饮组及疏肝理气组能抑制MDA-MB-231细胞中YAP蛋白在细胞核内的聚集.VP 12μmol/L能够诱导MDA-MB-231细胞凋亡,下调Hippo通路YAP、TAZ、AXL、TEAD的表达(P＜0.01),上调Cleaved PARP蛋白的表达水平(P＜0.01).结论:乳康饮含药血清能显著抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞Hippo通路关键蛋白YAP、TAZ表达,促进YAP、TAZ的磷酸化,并抑制YAP蛋白在细胞核内的聚集.VP能够通过下调YAP/TAZ及其下游与细胞增殖、凋亡相关靶基因的表达,诱导MDA-MB-231细胞凋亡,Hippo/YAP可能是乳康饮治疗乳腺癌的重要靶点之一.
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