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摘要 [目的]研究复方犬肠宁胶囊的质量标准。[方法]采用薄层色谱（TLC）法对复方犬肠宁胶囊中的黄连、黄柏、白头翁、黄芪进行定性鉴别，采用高效液相色谱法测定盐酸小檗碱的含量，研究复方犬肠宁胶囊的质量标准。[结果]薄层色谱鉴别表明，样品分离度好，斑点清晰，且阴性对照无干扰；盐酸小檗碱进样量在10.92～163.74 μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为Y=39 611X-2387.9（R2=0.999 8），平均加样回收率为97.60%，相对标准偏差RSD=1.64%（n=6）。[结论]该标准操作简便，专属性、稳定性、重复性良好，可用于犬肠宁胶囊的质量检测方法。
关键词 复方犬肠宁胶囊；薄层色谱法；高效液相色谱法；盐酸小檗碱；质量标准
中图分类号 S853.7 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）16-05039-03
复方犬肠宁胶囊由黄连、黄柏、白头翁、黄芪等十味中药通过制颗粒填充法制备而成的胶囊制剂。处方中白头翁性苦寒，归脾胃大肠经，具有清热解毒、凉血止痢的作用，黄连和黄柏性苦寒，分别归脾胃大肠和肾膀胱经，具有清热燥湿、泻火解毒的功效。通过临床调查研究结果显示，复方大肠宁胶囊主治犬湿热泻痢型腹泻或病毒感染引起的胃肠炎等。为有效控制犬肠宁胶囊的质量，笔者对其质量标准进行研究，以建立有效的质量控制方法，为复方白头翁胶囊的安全用药奠定理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器 Waters2695/2996/Empower高效液相色谱系统、METTLER TOLEDO XS105电子天平；白头翁皂苷B4（批号111766-200601）、黄芪甲苷对照品（批号110781 -200512）、盐酸小檗碱对照品（批号110713-200609、含量98.1%）和黄连（批号111430）、黄柏（批号111520）对照药材，均由中国药品生物制品检定所提供；复方白头翁胶囊样品（江苏农牧科技职业学院制药厂，批号091102、091110、091121）、乙腈（HPLC）、硅胶G薄层板（国药集团化学试剂有限公司）；水，为超纯水；其余试剂均为分析纯。
1.2 方法
1.2.1 薄层色谱（TLC）鉴别。
1.2.1.1 白头翁的薄层鉴别。取本品内容物2 g，加甲醇20 ml，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取白头翁皂苷B4对照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验[1]，吸取上述2种溶液各3 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（65∶ 35∶ 10）下层液为展开剂、展开、取出、晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃烘至斑点清晰。
1.2.1.2 黄连、黄柏的薄层鉴别。取本品内容物0.5 g，加甲醇20 ml，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验[1]，吸取上述2种溶液各2 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（7∶ 1∶ 2）为展开剂，展开、取出、晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。
1.2.1.3 黄芪的薄层鉴别。取本品内容物10 g，加乙酸乙酯30 ml，超声处理30 min，滤过，滤液弃去，滤渣挥干，加甲醇30 ml，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，加水30 ml使溶解，滤过，滤液用水饱和正丁醇提取2次，每次20 ml，合并正丁醇提取液，先用等体积的氨试液振摇洗涤，再用等体积的水振摇洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验[1]，吸取供试品溶液5 μl、对照品溶液2 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（65∶ 35∶ 10）下层溶液为展开剂，展开、取出、晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃烘约10 min，日光下检视。
1.2.2 盐酸小檗碱的含量检测[1-4]。
1.2.2.1 色谱条件与系统适应性试验。色谱柱为AQ.C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.033 mol/L磷酸二氢钾溶液（25∶ 75），检测波长265 nm，流速1.0 ml/min，柱温30 ℃，进样量均为10 μl。在此色谱条件下，供试品溶液、对照品溶液、阴性样品溶液各10 μl进样测定。
1.2.2.2 供试品溶液及阴性样品溶液的制备。取本品粉末约0.4 g，精密称定，置25 ml量瓶中，加甲醇约20 ml，超声处理30 min，冷却至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。按处方，同法制成不含黄连、黄柏的阴性样品溶液。
1.2.2.3 线性关系考察。精密称取在105 ℃干燥5 h的盐酸小檗碱对照品5.26 mg置100 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密量取1.0、2.5、5.0、10.0、15.0 ml置25 ml量瓶中，各加甲醇至刻度，摇匀，制得每1 ml含盐酸小檗碱10.92、21.83、54.58、109.16、163.74 μg的溶液，在“1.2.2.1”色谱条件下，进样10 μl测定，以峰面积为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线，进行回归分析。
1.2.2.4 精密度试验。取上述同一对照品溶液10 μl，连续进样5次，按照“1.2.2.1”色谱条件测定峰面积，考察其日内精密度；取上述同一对照品溶液10 μl连续3 d，测定峰面积，考察其日间精密度。
1.2.2.5 加样回收率试验。分别取已知含量的样品5份，各精密加入一定量的盐酸小檗碱对照品，按“1.2.2.2”供试品溶液制备方法制备并测定，计算回收率。
关键词 复方犬肠宁胶囊；薄层色谱法；高效液相色谱法；盐酸小檗碱；质量标准
中图分类号 S853.7 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）16-05039-03
复方犬肠宁胶囊由黄连、黄柏、白头翁、黄芪等十味中药通过制颗粒填充法制备而成的胶囊制剂。处方中白头翁性苦寒，归脾胃大肠经，具有清热解毒、凉血止痢的作用，黄连和黄柏性苦寒，分别归脾胃大肠和肾膀胱经，具有清热燥湿、泻火解毒的功效。通过临床调查研究结果显示，复方大肠宁胶囊主治犬湿热泻痢型腹泻或病毒感染引起的胃肠炎等。为有效控制犬肠宁胶囊的质量，笔者对其质量标准进行研究，以建立有效的质量控制方法，为复方白头翁胶囊的安全用药奠定理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器 Waters2695/2996/Empower高效液相色谱系统、METTLER TOLEDO XS105电子天平；白头翁皂苷B4（批号111766-200601）、黄芪甲苷对照品（批号110781 -200512）、盐酸小檗碱对照品（批号110713-200609、含量98.1%）和黄连（批号111430）、黄柏（批号111520）对照药材，均由中国药品生物制品检定所提供；复方白头翁胶囊样品（江苏农牧科技职业学院制药厂，批号091102、091110、091121）、乙腈（HPLC）、硅胶G薄层板（国药集团化学试剂有限公司）；水，为超纯水；其余试剂均为分析纯。
1.2 方法
1.2.1 薄层色谱（TLC）鉴别。
1.2.1.1 白头翁的薄层鉴别。取本品内容物2 g，加甲醇20 ml，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取白头翁皂苷B4对照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验[1]，吸取上述2种溶液各3 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（65∶ 35∶ 10）下层液为展开剂、展开、取出、晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃烘至斑点清晰。
1.2.1.2 黄连、黄柏的薄层鉴别。取本品内容物0.5 g，加甲醇20 ml，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验[1]，吸取上述2种溶液各2 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（7∶ 1∶ 2）为展开剂，展开、取出、晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。
1.2.1.3 黄芪的薄层鉴别。取本品内容物10 g，加乙酸乙酯30 ml，超声处理30 min，滤过，滤液弃去，滤渣挥干，加甲醇30 ml，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，加水30 ml使溶解，滤过，滤液用水饱和正丁醇提取2次，每次20 ml，合并正丁醇提取液，先用等体积的氨试液振摇洗涤，再用等体积的水振摇洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验[1]，吸取供试品溶液5 μl、对照品溶液2 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（65∶ 35∶ 10）下层溶液为展开剂，展开、取出、晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃烘约10 min，日光下检视。
1.2.2 盐酸小檗碱的含量检测[1-4]。
1.2.2.1 色谱条件与系统适应性试验。色谱柱为AQ.C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.033 mol/L磷酸二氢钾溶液（25∶ 75），检测波长265 nm，流速1.0 ml/min，柱温30 ℃，进样量均为10 μl。在此色谱条件下，供试品溶液、对照品溶液、阴性样品溶液各10 μl进样测定。
1.2.2.2 供试品溶液及阴性样品溶液的制备。取本品粉末约0.4 g，精密称定，置25 ml量瓶中，加甲醇约20 ml，超声处理30 min，冷却至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。按处方，同法制成不含黄连、黄柏的阴性样品溶液。
1.2.2.3 线性关系考察。精密称取在105 ℃干燥5 h的盐酸小檗碱对照品5.26 mg置100 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密量取1.0、2.5、5.0、10.0、15.0 ml置25 ml量瓶中，各加甲醇至刻度，摇匀，制得每1 ml含盐酸小檗碱10.92、21.83、54.58、109.16、163.74 μg的溶液，在“1.2.2.1”色谱条件下，进样10 μl测定，以峰面积为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线，进行回归分析。
1.2.2.4 精密度试验。取上述同一对照品溶液10 μl，连续进样5次，按照“1.2.2.1”色谱条件测定峰面积，考察其日内精密度；取上述同一对照品溶液10 μl连续3 d，测定峰面积，考察其日间精密度。
1.2.2.5 加样回收率试验。分别取已知含量的样品5份，各精密加入一定量的盐酸小檗碱对照品，按“1.2.2.2”供试品溶液制备方法制备并测定，计算回收率。