Ghrelin对棕榈酸诱导的THP-1巨噬细胞上TLR4/NF-κB信号通路活化的作用

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目的探讨酰基化Ghrelin对棕榈酸(PA)诱导的人源单核巨噬细胞(THP-1巨噬细胞)上TLR4-NF-κB信号通路的作用。方法用不同浓度的PA孵育THP-1巨噬细胞株12h;用不同浓度的酰基化Ghrelin孵育THP-1巨噬细胞株4h后,再加入PA(200μmol/L)孵育12h。用实时定量PCR检测THP-1巨噬细胞上TLR4mRNA的表达水平;用Western印记检测TLR4蛋白和细胞内NF-κB p65磷酸化蛋白水平;用ELISA方法检测细胞上清液中IL-1β和TNF-α的浓度。结果与对照组比较,PA呈剂量依赖性增强THP-1巨噬细胞TLR4mRNA和蛋白的表达水平,以及NF-κB p65磷酸化蛋白水平和分泌TNF-α、IL-1β的能力(P均<0.05)。与PA(200μmol/L)组比较,酰基化Ghrelin呈剂量依赖性抑制THP-1巨噬细胞TLR4mRNA(P均<0.05)、TLR4蛋白和NF-κB p65磷酸化蛋白的水平(P均<0.01),以及降低THP-1巨噬细胞分泌TNF-α水平(P均<0.05)和IL-1β的水平(P均<0.01)。结论PA可剂量依赖性诱导THP-1巨噬细胞TLR4/NF-κB信号通路的活化;酰基化Ghrelin可剂量依赖性抑制PA诱导的THP-1巨噬细胞TLR4/NF-κB信号通路的活化。
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