【摘 要】
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目的 探究miR-132靶向调控磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)基因对雨蛙素诱导的急性胰腺炎(AP)模型胰腺腺泡细胞增殖、凋亡的影响。方法 体外诱导并培养AP MZ-M0321细胞,采用ELISA法检测空白对照组和雨蛙素组(经雨蛙素处理)细胞的IL-6、TNF-α表达水平。取经雨蛙素处理的细胞随机分为无义序列组(转染miR-132-mimics-NC序列)、miR-132过表达组(转染miR-1
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目的 探究miR-132靶向调控磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)基因对雨蛙素诱导的急性胰腺炎(AP)模型胰腺腺泡细胞增殖、凋亡的影响。方法 体外诱导并培养AP MZ-M0321细胞,采用ELISA法检测空白对照组和雨蛙素组(经雨蛙素处理)细胞的IL-6、TNF-α表达水平。取经雨蛙素处理的细胞随机分为无义序列组(转染miR-132-mimics-NC序列)、miR-132过表达组(转染miR-132-mimics序列)和共转染组(转染质粒载体pc DNA-PTEN+miR-132-mimics序列)。采用实时荧光定量PCR法检测各转染组miR-132、PTEN m RNA的表达水平。采用MTT法、Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞的增殖、凋亡情况。采用蛋白质印迹法检测各转染组中PTEN、增殖和凋亡相关蛋白的表达水平。应用Target Scan数据库预测miR-132与PTEN的靶向关系,并采用双荧光素酶报告基因实验验证。结果 AP细胞模型构建成功。经成功转染细胞后,与无义序列组比较,miR-132过表达组细胞的增殖抑制率、凋亡率、PTEN、Bax蛋白表达水平降低,Ki-67、Bcl-2蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义(P均<0.05);与miR-132过表达组比较,共转染组细胞的增殖抑制率、凋亡率、PTEN、Bax蛋白表达水平升高,Ki-67、Bcl-2蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Target Scan数据库预测结果显示,PTEN是miR-132的潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验结果证实两者存在靶向关系。结论 miR-132过表达可靶向下调PTEN表达,促进雨蛙素诱导的AP MZ-M0321细胞增殖并抑制细胞凋亡。
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