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构建整合型核黄素质粒pRB63，该质粒含有解调的B．subtilis核黄素操纵子，将其转化入B．subtilis RH13并在染色体上进行适当的扩增后得到RH13∷[pRB63]n系列工程菌，其核黄素合成能力随着pRB63扩增程度的增加而增强，最终达到RH13的6-7倍。随后以RH13∷[pRB63]n系列工程菌和B．subtilis YB1为亲株进行原生质体融合，筛得重组菌B．subtilis RH33。该菌在含10％葡萄糖或蔗糖的分批发酵中培养64h可产核黄素量4．2g·L^-1。采用以葡萄