研究microRNA-214(miR-214)在晚期下咽鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达情况,及其对下咽癌FaDu细胞系侵袭、迁移、克隆形成能力的影响,并分析其可能机制。
方法利用qRT-PCR技术检测30例晚期下咽鳞癌患者肿瘤组织及正常黏膜组织中miR-214的表达;通过转染过表达载体hsa-mir-214上调FaDu细胞中miR-214的表达;采用Transwell侵袭、迁移实验和平板克隆实验,分别检测miR-214表达上调后对FaDu细胞侵袭、迁移及克隆形成能力的影响;利用Western blot检测上调miR-214表达对Twist蛋白表达的影响。
结果miR-214在晚期下咽鳞癌组织中相对表达(
±s)为(0.311±0.206)明显低于下咽正常黏膜组织中的相对表达为(1.620±1.394),差异有统计学意义(t=5.09,P<0.05)。实验组FaDu细胞转染hsa-mir-214后,miR-214的表达较阴性对照组明显上调(t=6.347,P<0.05)。Transwell迁移和侵袭实验显示,实验组FaDu细胞迁移能力及侵袭能力均明显低于对照组(t=11.6,P<0.01;t=6.499,P<0.05)。平板克隆实验显示,实验组与对照组相比,平均克隆形成数及克隆形成率差异均无统计学意义(t=0.592,P>0.05),miR-214对FaDu细胞增殖能力无明显影响。Western blot结果显示,miR-214上调后的实验组细胞Twist蛋白的表达明显低于对照组细胞中的表达(t=6.545,P<0.05)。
miR-214在晚期下咽鳞癌组织中低表达,且可明显抑制FaDu细胞的侵袭、迁移能力,其作用机制可能与抑制Twist蛋白表达有关。miR-214对FaDu细胞增殖能力无明显影响。