【摘 要】
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目的 探讨野蔷薇根总黄酮(TF-RM)对H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)线粒体功能及凋亡通路的影响.方法 将SD雄性大鼠随机分正常对照组、维生素C组(0.08 g·kg-1)、TF-RM组(2.5 g·kg-1),每组10只.灌胃给药,每天1次,连续7d,制备含药血清.采用H2O2(950 μmol·L-1)诱导HUVEC损伤,并分别与维生素C及TF-RM低、中、高剂量(5％、10％、15％)含药血清共培养24 h.采用DCFH-DA荧光定量法检测HUVEC中活性氧(ROS)的含量;JC-
【机 构】
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河南省中医药研究院,河南郑州450004;河南中医药大学,河南郑州450008
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目的 探讨野蔷薇根总黄酮(TF-RM)对H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)线粒体功能及凋亡通路的影响.方法 将SD雄性大鼠随机分正常对照组、维生素C组(0.08 g·kg-1)、TF-RM组(2.5 g·kg-1),每组10只.灌胃给药,每天1次,连续7d,制备含药血清.采用H2O2(950 μmol·L-1)诱导HUVEC损伤,并分别与维生素C及TF-RM低、中、高剂量(5％、10％、15％)含药血清共培养24 h.采用DCFH-DA荧光定量法检测HUVEC中活性氧(ROS)的含量;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位的变化;Fluo-4染色法检测细胞内Ca2+浓度;Western Blot法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-9、Caspase-3蛋白的表达情况.结果 与正常对照组比较,模型组HUVEC内的ROS水平、线粒体膜电位下降率、Ca2+浓度以及Bax蛋白表达量显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.01).与模型组比较,TF-RM各剂量组细胞内的ROS水平、Ca2+浓度及Bax蛋白表达量均明显降低(P＜0.05,P＜0.01),Bcl-2蛋白表达量升高(P＜0.05);TF-RM高剂量组的线粒体膜电位下降率明显降低(P＜0.05);TF-RM中剂量组的Caspase 9蛋白表达量明显降低(P＜0.05).结论 TF-RM能够改善H2O2诱导的HUVEC线粒体功能损伤,发挥对细胞凋亡的保护作用.
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