【摘 要】
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为了实现糖苷类物质的高效转化,将来源于副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei） TK1501β-葡糖苷酶基因连接于表达载体pET28a（+）上,在E. coli BL21中表达,重组酶经镍离子亲和层析分离得到纯酶,其分子质量和比酶活分别为86. 63kDa和675. 56U/mg。最适作用温度和pH分别为30℃和6. 5。Mg2+和Ca2+对β-葡糖苷酶酶活抑制作用最小,Cu
【机 构】
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省部共建食品营养与安全国家重点实验室天津科技大学生物工程学院
【基金项目】
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宁夏回族自治区重点研发计划（2018BBF02008）； 国家级大学生创新创业训练计划（201810234004）资助项目；
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为了实现糖苷类物质的高效转化,将来源于副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei） TK1501β-葡糖苷酶基因连接于表达载体pET28a（+）上,在E. coli BL21中表达,重组酶经镍离子亲和层析分离得到纯酶,其分子质量和比酶活分别为86. 63kDa和675. 56U/mg。最适作用温度和pH分别为30℃和6. 5。Mg2+和Ca2+对β-葡糖苷酶酶活抑制作用最小,Cu2+几乎使其丧失催化活性。其底物特异性较宽泛,对大豆异黄酮、栀子苷、水杨苷、七叶苷、虎杖苷、熊果苷均有降解作用。以β-pNPG为底物时,该酶的Km和Vmax分别为1. 44mmol/L和58. 32mmol/（L·s）,催化系数kcat为3 982/s。结果与分析表明,来源于副干酪乳杆菌TK1501β-葡糖苷酶对水解大豆异黄酮和合成糖苷将会发挥重要作用。
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