【摘 要】
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目的构建针对PPARγ2基因siRNA重组逆转录病毒质粒载体，为进一步基因治疗奠定基础。方法选择RNA干涉靶序列，体外合成两段互补的寡核苷酸，通过与载体连接，转化大肠杆菌，扩增、纯化
【机 构】
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郑州大学第一附属医院骨科,郑州大学基础医学院
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目的构建针对PPARγ2基因siRNA重组逆转录病毒质粒载体，为进一步基因治疗奠定基础。方法选择RNA干涉靶序列，体外合成两段互补的寡核苷酸，通过与载体连接，转化大肠杆菌，扩增、纯化得到所需质粒，通过聚合酶链反应（PCR）琼脂糖凝胶电泳鉴定及利用载体上的BamHⅠ，ClaⅠ和HindⅢ位点进行两次双酶切鉴定，重组载体应分别产生350bp，1100bp，5000bp和430bp，1100bp，5000bp六个片段，选择电泳及酶切正确的重组载体进行测序，保证siRNA的方向和序列正确。结果质粒中插入寡核苷酸的
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