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目的
探讨转录因子FOXO3a在富氢液减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤中的作用。
方法雄性SD大鼠72只，体重280～320 g，采用随机数字表法，将其随机分成6组(n＝12)：假手术组(Ⅰ组)、全脑缺血再灌注组(Ⅱ组)、富氢液组(Ⅲ组)、二甲基亚砜(DMSO)溶剂组(Ⅳ组)、c–jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂组(Ⅴ组)、JNK抑制剂＋富氢液组(Ⅵ组)。采用经食管心脏起搏诱发心脏骤停以及心肺复苏建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型。Ⅰ组不给予电刺激及心肺复苏；Ⅱ～Ⅵ组电刺激4 min建立全脑缺血再灌注模型；Ⅲ组和Ⅵ组于再灌注即刻及6 h腹腔注射富氢液5 ml/kg，其余组腹腔注射等容量生理盐水；Ⅴ组和Ⅵ组于缺血前30 min经侧脑室给予10 μl JNK抑制剂SP600125，Ⅳ组于缺血前30 min经侧脑室给予等容量DMSO溶剂。再灌注后24 h行神经功能损伤评分；随后各组随机处死6只大鼠，取全脑组织，行HE染色，光镜下观察海马CA1区病理性改变，并进行椎体细胞计数；另外6只取海马组织，采用Western印迹法检测海马神经元磷酸化c–jun氨基末端激酶(p–JNK)、JNK及胞核和胞质FOXO3a表达。
结果再灌注24 h后，Ⅰ组海马CA1区椎体细胞正常，未出现神经功能损伤；与Ⅰ组比较，Ⅱ组和Ⅳ组椎体细胞损伤较重，神经功能损伤严重，p–JNK表达增加，FOXO3a在细胞核中表达增加；与Ⅱ组相比，Ⅲ组、Ⅴ组和Ⅵ组海马CA1区椎体细胞损伤较轻，神经功能损伤减轻，p–JNK表达降低，FOXO3a在细胞核中表达显著减少。
结论富氢液减轻大鼠全脑再灌注损伤的机制可能与抑制JNK活性，减少FOXO3a向细胞核易位，抑制其活性有关。