产热凝胶土壤杆菌ATCC 31749蛋白质组双向电泳图谱的构建

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建立了热凝胶生产菌土壤杆菌菌体总蛋白的蛋白质提取方法和双向电泳方案,确定了使用蛋白质裂解液(7mol/L尿素,2mol/L硫脲,1%ASB-14去垢剂,40mmol/L Tris,0.001%溴酚蓝,1mmol/LEDTA,1%TBP和1%两性电解质)结合超声破碎法来提取菌体总蛋白的方案为最佳,选择17cmpH4~7的IPG预制干胶条和适宜的等电聚焦程序进行第一向等电聚焦电泳。最后比较了考马斯亮蓝和硝酸银两种染色方法对双向电泳图谱的影响,确立了蛋白分辨率高并且重复性较好的土壤杆菌双向电泳图谱构建的可靠方法
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