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目的：对八珍益母丸中芍药苷的HPLC法测定结果的不确定度进行分析，找出影响不确定度的因素。方法：参照《中华人民共和国药典》2015版一部八珍益母丸含量测定方法，对测定过程和步骤进行量化分析，计算合成不确定度，并确定测量结果在95％置信区间下的扩展不确定度。结果：采用HPLC法测定八珍益母丸中芍药苷含量的扩展不确定度为每丸0．20mg。结论：对照品的称量是本次实验不确定度的主要来源，对称量过程的严格控制有利于提高检测结果的可靠性、准确性。