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摘要:研究香菇在不同生长期中甲醛含量的变化情况,采用乙酰丙酮分光光度法利用甲醛与乙酰丙酮及氨生成黄色化合物二乙酰基二氢卢剔啶后,于412nm下进行分光光度来全面跟踪测定香菇不同生长期甲醛的含量。结果表明:在培养基检测不出甲醛,但随着香菇的生长发育,自身甲醛含量升高。
关键词:本底甲醛香菇乙酰丙酮法分光光度法测定
香菇中含有甲醛,这已经成为不争的事实。早在1974 年KenshiroFujimoto等对香菇中甲醛形成机理的研究时指出:香菇中甲醛含量高,在生长过程中甲醛含量稳定。为了进一步弄清此问题,本试验从香菇栽培原料、子实体不同的发育阶段测定其甲醛含量,试图探索出其变化规律,以加快香菇中甲醛的形成机理及存在状态的研究,为香菇中甲醛毒性研究提供理论支持和科学依据。
1 实验部分
1.1 材料及处理
香菇栽培原料,菌棒(丽水市莲都区某香菇栽培基地提供)
香菇样品从基地采集后,为防止香菇中甲醛的挥发,用塑料袋密封运回实验室,当天测定。
1.2 主要仪器与试剂
紫外分光光度计、水蒸气蒸馏装置、数显电热恒温水浴、粉碎机
乙酰丙酮溶液:100ml蒸馏水中加入醋酸铵25g,冰醋酸3ml 和乙酰丙酮0.140ml,振摇促溶,贮备于棕色瓶中。
甲醛储备液:取36%~38%甲醛1g定容于100ml容量瓶。取10ml该溶液,加0.10mol/L碘溶液50ml,1mol/L氢氧化钠溶液20ml,室温放置15min后,加10%硫酸溶液15ml,用0.10mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定,滴定至淡黄色时,加入1ml淀粉溶液,继续滴定至无色,同时取10ml蒸馏水进行空白实验。
甲醛标准使用液:将标定后的甲醛标准储备液用蒸馏水稀释至10.0μg/ml
1.3 实验方法
1.3.1 样品的前处理
将香菇打成细末,称取10.000g于500mL蒸馏瓶中,加入体积分数10% 磷酸溶液10mL,玻璃珠数粒,加蒸馏水至约200mL,连接冷凝装置。冷凝管下口插入盛有20mL蒸馏水且置于冰浴的100mL烧杯中。加热蒸馏,收集蒸馏液至约80~90mL,放至室温,移入100mL容量瓶中,用蒸馏水定容。
1.3.2 甲醛标准曲线的绘制
分别吸取10μg/mL的甲醛标准溶液0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL于25mL容量瓶中,加入乙酰丙酮溶液1.0mL,加水定容至刻度,混合均勻,置40℃水浴中保温30min,取出冷却至室温。以空白为参比,于波长412nm 处,用1cm 比色皿进行比色,测定吸光度,绘制标准曲线。
1.3.3 甲醛测定方法——乙酰丙酮分光光度法
采用乙酰丙酮分光光度法测定甲醛含量。其操作原理为:用蒸馏水蒸馏样品中的甲醛,同时用水吸收,吸收液中的甲醛与乙酰丙酮及铵离子反应生产黄色物质二乙酰基二氢卢剔啶后,412nm下进行分光光度测定,与标准比较定量。
1.3.4 香菇不同生长期甲醛含量的测定
采集香菇栽培原料,自行栽培,收集不同发育阶段(生长2天、4天、6天、8天、10天、12天、14天)鲜菇各100g左右。碾碎后分别称10g的鲜菇,测定栽培原料及各生长发育阶段香菇的甲醛含量。
2 结果与讨论
2.1 甲醛的标准曲线
得到的线形回归方程为y=0.0069x+0.0135,相关系数为0.9961,具有较好的相关性。
2.2 不同生长时期香菇中甲醛含量的变化
香菇不同生长时期甲醛的测定结果如下表所示:
由表1可以得出香菇原料基中不含有甲醛,出菇后菇体内甲醛含量呈递增趋势。出菇后14天子实体成熟,菇体内甲醛达到最大值15.67mg/kg。这一结果与林树钱等人的试验大致相符。说明香菇子实体在生长发育过程中自然形成一定量的甲醛,是香菇生理代谢产物。
甲醛是对人体健康非常有害的化学物质,然而对于香菇自身代谢产生的甲醛,其含量远远低于我国和国际所规定的标准,所以对人体不会产生影响。
参考文献:
[1]Kenshiro Fujimoto,et al.The Mechanism of FromaldehydeFormat ion In Shii-Ta-ke Mushroom,Mushroom Science(Part I) proceedings of the Ninth Internat ional Scientific Congress on the Cultivation of Edibl e Fungi,Tokyo,1974(第九届东京,食用菌栽培科学国际会议论文1974年).
[2]陈乃平.乙酰丙酮分光光度法测定微量甲醛,贵州化工.1999,2:36-43.
[3]林树钱,王赛贞,林志杉.香菇生长发育和加工贮存中甲醛含量变化的初步研究.中国食用菌.2002,21(3):26-28
[4]福建进出口商品检验检疫局.蘑菇,姬松茸,杏鲍菇,白灵菇的甲醛测定报告.
[5]杨雪娇,黄伟,温健昌等.2005 年东莞市食用菌甲醛含量抽查结果分析[J].中国卫生检验杂志,2007,19(2):150-152.
关键词:本底甲醛香菇乙酰丙酮法分光光度法测定
香菇中含有甲醛,这已经成为不争的事实。早在1974 年KenshiroFujimoto等对香菇中甲醛形成机理的研究时指出:香菇中甲醛含量高,在生长过程中甲醛含量稳定。为了进一步弄清此问题,本试验从香菇栽培原料、子实体不同的发育阶段测定其甲醛含量,试图探索出其变化规律,以加快香菇中甲醛的形成机理及存在状态的研究,为香菇中甲醛毒性研究提供理论支持和科学依据。
1 实验部分
1.1 材料及处理
香菇栽培原料,菌棒(丽水市莲都区某香菇栽培基地提供)
香菇样品从基地采集后,为防止香菇中甲醛的挥发,用塑料袋密封运回实验室,当天测定。
1.2 主要仪器与试剂
紫外分光光度计、水蒸气蒸馏装置、数显电热恒温水浴、粉碎机
乙酰丙酮溶液:100ml蒸馏水中加入醋酸铵25g,冰醋酸3ml 和乙酰丙酮0.140ml,振摇促溶,贮备于棕色瓶中。
甲醛储备液:取36%~38%甲醛1g定容于100ml容量瓶。取10ml该溶液,加0.10mol/L碘溶液50ml,1mol/L氢氧化钠溶液20ml,室温放置15min后,加10%硫酸溶液15ml,用0.10mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定,滴定至淡黄色时,加入1ml淀粉溶液,继续滴定至无色,同时取10ml蒸馏水进行空白实验。
甲醛标准使用液:将标定后的甲醛标准储备液用蒸馏水稀释至10.0μg/ml
1.3 实验方法
1.3.1 样品的前处理
将香菇打成细末,称取10.000g于500mL蒸馏瓶中,加入体积分数10% 磷酸溶液10mL,玻璃珠数粒,加蒸馏水至约200mL,连接冷凝装置。冷凝管下口插入盛有20mL蒸馏水且置于冰浴的100mL烧杯中。加热蒸馏,收集蒸馏液至约80~90mL,放至室温,移入100mL容量瓶中,用蒸馏水定容。
1.3.2 甲醛标准曲线的绘制
分别吸取10μg/mL的甲醛标准溶液0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL于25mL容量瓶中,加入乙酰丙酮溶液1.0mL,加水定容至刻度,混合均勻,置40℃水浴中保温30min,取出冷却至室温。以空白为参比,于波长412nm 处,用1cm 比色皿进行比色,测定吸光度,绘制标准曲线。
1.3.3 甲醛测定方法——乙酰丙酮分光光度法
采用乙酰丙酮分光光度法测定甲醛含量。其操作原理为:用蒸馏水蒸馏样品中的甲醛,同时用水吸收,吸收液中的甲醛与乙酰丙酮及铵离子反应生产黄色物质二乙酰基二氢卢剔啶后,412nm下进行分光光度测定,与标准比较定量。
1.3.4 香菇不同生长期甲醛含量的测定
采集香菇栽培原料,自行栽培,收集不同发育阶段(生长2天、4天、6天、8天、10天、12天、14天)鲜菇各100g左右。碾碎后分别称10g的鲜菇,测定栽培原料及各生长发育阶段香菇的甲醛含量。
2 结果与讨论
2.1 甲醛的标准曲线
得到的线形回归方程为y=0.0069x+0.0135,相关系数为0.9961,具有较好的相关性。
2.2 不同生长时期香菇中甲醛含量的变化
香菇不同生长时期甲醛的测定结果如下表所示:
由表1可以得出香菇原料基中不含有甲醛,出菇后菇体内甲醛含量呈递增趋势。出菇后14天子实体成熟,菇体内甲醛达到最大值15.67mg/kg。这一结果与林树钱等人的试验大致相符。说明香菇子实体在生长发育过程中自然形成一定量的甲醛,是香菇生理代谢产物。
甲醛是对人体健康非常有害的化学物质,然而对于香菇自身代谢产生的甲醛,其含量远远低于我国和国际所规定的标准,所以对人体不会产生影响。
参考文献:
[1]Kenshiro Fujimoto,et al.The Mechanism of FromaldehydeFormat ion In Shii-Ta-ke Mushroom,Mushroom Science(Part I) proceedings of the Ninth Internat ional Scientific Congress on the Cultivation of Edibl e Fungi,Tokyo,1974(第九届东京,食用菌栽培科学国际会议论文1974年).
[2]陈乃平.乙酰丙酮分光光度法测定微量甲醛,贵州化工.1999,2:36-43.
[3]林树钱,王赛贞,林志杉.香菇生长发育和加工贮存中甲醛含量变化的初步研究.中国食用菌.2002,21(3):26-28
[4]福建进出口商品检验检疫局.蘑菇,姬松茸,杏鲍菇,白灵菇的甲醛测定报告.
[5]杨雪娇,黄伟,温健昌等.2005 年东莞市食用菌甲醛含量抽查结果分析[J].中国卫生检验杂志,2007,19(2):150-152.