【摘 要】
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用RT—PCR扩增含有Xhol／EcoRI酶切位点的Sirt1片段，克隆、测序后，构建真核荧光表达载体pEGFP—N1-Sirt1、脂质体介导转染293细胞，最后利用SDS—PAGE检测蛋白表达情况。结果表明，经
【机 构】
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沈阳农业大学畜牧兽医学院,抚顺农业特产学校
【基金项目】
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辽宁省自然科学基金资助项目（20050302）,辽宁省教育厅科研基金资助项目（2007304）：
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用RT—PCR扩增含有Xhol／EcoRI酶切位点的Sirt1片段，克隆、测序后，构建真核荧光表达载体pEGFP—N1-Sirt1、脂质体介导转染293细胞，最后利用SDS—PAGE检测蛋白表达情况。结果表明，经脂质体介导重组体pEGFP-N1-Sirt1可成功转染293细胞；转染48h后，荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达；SDS—PAGE证明表达的融合蛋白相对分子质量约为41kD。该结果为进一步研究Sirt1在哺乳动物细胞中的作用奠定了基础。
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