【摘 要】
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为了掌握豫北猪圆环病毒2型(PCV-2)的流行毒株,试验采用PCR技术初步鉴定一例疑似PCV-2感染猪的病粒,处理研磨样品并接种到PK-15细胞上分离PCV-2毒株,采用间接免疫荧光技术进
【机 构】
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安阳工学院生物与食品工程学院/河南省动物疫病防控与营养免疫院士工作站/河南省兽用生物制品研发与应用国际联合实验室;
【基金项目】
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安阳工学院博士科研启动基金项目(BSJ2016008)
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为了掌握豫北猪圆环病毒2型(PCV-2)的流行毒株,试验采用PCR技术初步鉴定一例疑似PCV-2感染猪的病粒,处理研磨样品并接种到PK-15细胞上分离PCV-2毒株,采用间接免疫荧光技术进一步确诊该病例,通过特异性引物以PCR技术从感染PK-15细胞中扩增该毒株的全基因片段,然后克隆到p MD20-T载体,对PCR鉴定阳性质粒进行测序和分析。结果表明:成功鉴定、分离出一株豫北猪PCV-2毒株,将此分离株命名为PCV-2-HNAY2017;间接免疫荧光试验再次确证该毒株为PCV-2G毒株;阳性克隆基因测序显示其全基因组长为1 767 bp;遗传进化树证实PCV-2-HNAY2017与河南南阳毒株(GU938302.1 HNNY0912-PCV-2)的核苷酸同源性最高(99.7%),与KX929000.1 GX230-PCV-2关系较远(94.5%),且与猪圆环病毒1型(PCV-1)和猪圆环病毒3型(PCV-3)属于不同分支。说明该分离株为PCV-2,与已公布的序列存在一定基因变异。
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