【摘 要】
：
目的 构建含有TβRⅡDNglytk的慢病毒质粒载体,生产出相应的慢病毒,用于对TGF-β失敏感的CTL的制备.方法 先以原始质粒为模板,PCR扩增TβRⅡDN和HSV-tk基因,用重组PCR方法获得TβRⅡDNglytk融合基因,用PCR扩增出TRANSglytk基因;再用TOPO克隆技术将其连接到慢病毒表达质粒,经测序验证;最后用Invitrogen公司提供的ViraPowerTM Lenti
【机 构】
：
300211,天津,天津市泌尿外科研究所,天津市泌尿外科重点实验室,300211,天津,天津市泌尿外科研究所,天津市泌尿外科重点实验室,天津医科大学第二医院泌尿外科,300211,天津,天津市泌尿外科
论文部分内容阅读
目的 构建含有TβRⅡDNglytk的慢病毒质粒载体,生产出相应的慢病毒,用于对TGF-β失敏感的CTL的制备.方法 先以原始质粒为模板,PCR扩增TβRⅡDN和HSV-tk基因,用重组PCR方法获得TβRⅡDNglytk融合基因,用PCR扩增出TRANSglytk基因;再用TOPO克隆技术将其连接到慢病毒表达质粒,经测序验证;最后用Invitrogen公司提供的ViraPowerTM Lentiviral System和293FT细胞合成慢病毒,并用293细胞完成其滴度测定.结果 完成慢病毒质粒TβRⅡDNglytk的构建,经测序验证序列正确;生产的慢病毒具有感染能力,其滴度达到实验要求,可用于对TGF-β不敏感的肿瘤特异性CTL的制备.结论 运用重组PCR技术合成TβRⅡDNglytk及TRANSglytk两个融合基因,并用TOPO克隆技术连接到pLenti6/V5-D-TOPO(R)载体,成功构建了慢病毒表达载体,说明此方法用于病毒载体的构建是快捷可行的;用ViraPowerTM Lentiviral System和293FT细胞成功制备了慢病毒,为生产TGF-β不敏感的人肿瘤特异性CTL提供了基础。
其他文献
腔镜甲状腺手术以其美观、微创、并发症少及术后恢复快等优点应用于甲状腺良性疾病目前已获得广泛认可,术式不断出现,目前大致可分为完全腔镜下和腔镜辅助两类手术方式;根据建腔方式又可分为应用CO2建腔和无需CO2建腔两类[1];按其手术径路义可分为经颈部、锁骨下、腋窝、乳晕、前胸壁等径路;各有其优缺点.但对甲状腺癌的临床应用却存在诸多质疑与争论。
目的 了解2008年重庆市主城区社区人群糖尿病(DM)患病情况.方法 调查于2008年3月至6月进行,对重庆大学A、B校区3 668例20岁以上自然人群进行口服葡萄糖耐量(OGTT)等检查.结果 DM、糖耐量异常(IGT)、空腹血糖受损(IFG)的患病率分别为7.44%、6.43%、7.16%,且随年龄增加而增高.结论 重庆市主城区社区人群DM患病率较高,并旱逐年上升趋势,应加强防治。
POEMS(polyneuropathy,organomegaly,endocrinopathy,m-protein,skin changes)综合征又称Crow-Fukase综合征(以下简称本病),是一组罕见的以多发性周围神经病为突出表现,常有多系统损害及浆细胞异常增生的临床症候群.而糖尿病也可存在弥漫性对称性感觉运动神经病变,本病如以糖尿病为初发表现,易造成误诊.现报告1例并作相关文献复习。
1 流行病学甲状腺癌的发病率上升 甲状腺癌虽然相对少见,仅占所有癌症的2%,但却是最常见的内分泌恶性肿瘤,在过去15年～20年,其发病率上升.据美国监测流行病学和最终结果资料,近10年女性甲状腺癌的发病率上升速度超过其他肿瘤位列第一,男性甲状腺癌发病率的上升速度也排在第三位[1],女性占2/3,男性占1/3。
自1894年Halsted和Meyer设计使用乳腺癌典型根治术以来,乳腺癌手术历经了扩大/超根治术,再回到根治术,向改良根治术及保乳手术的转变,手术形式的转变总是随着人们对乳腺癌治疗观念的改变而变化、进展.100多年来,在乳腺癌治疗经验和教训积累的基础上,乳腺癌外科治疗已从过去的单纯从解剖学观点拟定手术方案,发展到现在的根据生物学行为制定综合治疗策略,外科手术方式也从"可耐受的最大治疗"模式转变为
目的 探讨胰头十二指肠切除术后胰肠吻合口裂开胰漏并引起腹腔大出血的外科治疗方法.方法 3例行胰头十二指肠切除术后发生胰肠吻合口破裂、严重胰漏伴腹腔大出血均急诊再次手术治疗,术中借用主胰管置管并将胰液引流到临近的空肠袢内.结果 术后经支持治疗,持续腹腔冲洗,抑制胰酶分泌,治疗成功.结论 主胰管导管桥式内引流术,在胰头十二指肠切除术后胰肠吻合口裂开胰漏导致的腹腔大出血抢救治疗中具有简单快捷有效的治疗效
目的 探讨双侧甲状腺癌的诊断和治疗方法.方法 回顾性分析68例双侧甲状腺癌的临床资料.结果 行甲状腺全切+双侧功能性清扫22例,全切+单侧功能性清扫30例,全切+Ⅵ区淋巴结清扫14例,姑息性手术2例.12例术后131I治疗.术后并发症:5例单侧短暂喉返神经麻痹;1例双侧永久性喉返神经损伤经气管切开,带管生存;1例气管软化,窒息,经气管切开,带管生存;6例短暂低血钙抽搐;1例永久性甲状旁腺功能低下;
目的 动态监测乳腺癌患者外周血液中CK19及hMAM mRNA的表达,探讨其临床意义.方法 应用实时荧光定量PCR技术,动态检测40例经病理证实的乳腺癌及10例健康对照组外周血液中CK19及hMAM的表达.结果 40例乳腺癌循环血液中CK19及hMAM的表达显著高于正常人群.在治疗过程中,乳腺癌患者循环血液中上述指标表达的阳性率呈下降趋势.不同分期乳腺癌在治疗前、中期的表达无显著性差异,但在治疗后
胃肠道间质瘤(gastrointestinalstromal tumors,GIST)是一种起源于胃肠道壁间质(结缔组织)、以梭形细胞或/和上皮样细胞为主的消化道间质肿瘤[1].从食管到肛门均可发生,多发生在胃肠道,其中胃占60%～70%,小肠占20%～30%,食管、结肠和直肠<10%,称为胃肠道型间质瘤.还有2%～4%发生于胃肠道外的网膜、肠系膜及后腹膜等部位[2],称为胃肠道外型间质瘤。
Pregnancy is rare in patients with a single ventricle and transposition of the great arteries (TGA). This paper reports the management of a parturient with a single ventricle and TGA。