木瓜蛋白酶无载体固定化研究

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交联酶聚体(CLEA)是一种新型的无载体固定化技术。以木瓜蛋白酶为模型体系,系统地研究了木瓜蛋白酶的提取纯化方法,固定化制备CLEA的方法以及游离木瓜蛋白酶和CLEA的应用条件、稳定性和不同离子对其活力的影响。结果表明,最适催化温度游离酶为65℃,CLEA最适催化温度为75℃;游离酶最适催化pH值为6.6,CLEA最适催化pH值为7.6;米氏常数Km游离酶为1.25μmol/mL,CLEA为0.44μmol/mL。与游离木瓜蛋白酶相比,CLEA的米氏常数Km减小,具有耐高温、活性强、稳定性好等特征,能耐受一定pH值和温度变化,对金属离子不敏感。
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