产气荚膜梭菌ε毒素突变基因的表达及其抗体中和效价测定

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cn0531

【摘要】

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为研究突变产气荚膜梭菌ε毒素（mε）的抗体是否具有中和作用，本研究以毒素D型产气荚膜梭菌全基因组DNA为模板，应用重叠延伸PCR技术（SOE-PCR）将ε毒素第106位的组氨酸残基定点突变为

【作者】

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王超唐丽杰葛俊伟乔薪媛崔文姜艳萍李一经

【机构】

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东北农业大学动物医学院

【出处】

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中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2013年6期

【关键词】

：

产气荚膜梭菌ε毒素突变基因大肠杆菌表达抗体中和效价 Clostridium perfringens e-toxin mutant gene expre

【基金项目】

：

基金项目：国家863计划（2011AA10A213）

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为研究突变产气荚膜梭菌ε毒素（mε）的抗体是否具有中和作用，本研究以毒素D型产气荚膜梭菌全基因组DNA为模板，应用重叠延伸PCR技术（SOE-PCR）将ε毒素第106位的组氨酸残基定点突变为脯氨酸残基，扩增出mε基因，使其丧失生物学毒性而保持免疫原性。以pET-28a为表达载体，构建重组表达质粒pET—mε，并转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达重组mε蛋白。SDS-PAGE及westem blot分析显示。重组蛋白约39ku．主要以包涵体形式存在。将重组蛋白免疫家兔，所制备的产气荚膜梭菌mε毒素蛋白的抗血清

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