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摘 要：开展含枯草芽孢杆菌的生物菌肥在大田种植中不同施用时期对香蕉枯萎病防控效果的对比试验。试验表明，施用枯草芽孢杆菌生物菌肥有益健壮植株，有效降低枯萎病发生情况及病级，对土壤中的病原菌也有明显的抑制作用。在营养生长期施用菌肥对枯萎病的防控效果最好，其次是孕蕾期，再次是果实发育期，不施用菌肥处理枯萎病发生情况最严重。
关键词：枯草芽孢杆菌 生物菌肥 香蕉枯萎病
Abstract：We conducted a comparative experiment on the control efficiency of biological bacterial manure which contains Bacillus subtilis on banana Fusarium oxysporum at different growth stages of banana. Results show that application of bacterial manure can make banana plant strong， effectively reduce incidence of banana Fusarium oxysporum， and obviously inhibit soil pathogens. The best time to apply bacterial manure is at the vegetative growth stage， secondly the bud formation stage， and then the fruit development stage. The control group without application of bacterial manure was attacked by severe Fusarium oxysporum.
Key words：Bacillus subilis; organic bacterial manure; banana Fusarium oxysporum
香蕉枯萎病又稱香蕉巴拿马病或黄叶病，是危害世界香蕉生产的一种毁灭性土传维管束系统病害。香蕉枯萎病最早于1896年在巴拿马发生，1967年我国台湾首次发现香蕉枯萎病，20世纪末该病传入我国广东省珠江三角洲地区，随后传入海南、福建等省，2007年广西发生香蕉枯萎病[3]。香蕉枯萎病病原菌在土壤中潜伏期长，发病迅速，目前还没有找到一种有效的防治香蕉枯萎病的化学药剂可应用于田间。有研究表明，许多微生物对香蕉枯萎病菌具有拮抗作用，用生物防治的方法来控制香蕉枯萎病已成为当前研究热点[4]。试验中，通过土壤分离得到的枯草芽孢杆菌等拮抗细菌对香蕉枯萎病有明显的抑制作用[5]，是一种理想的生防微生物。Perez-vicente等[6]试验证明抗病品种的种植与生防菌施用相结合，对香蕉枯萎病的防治效果可达95 %以上。鉴于此，本单位开展了含枯草芽孢杆菌的生物菌肥在大田试验中对香蕉枯萎病防控效果的研究，对香蕉枯萎病的生物防治研究进行初步的探索。
1 材料与方法
1.1 试验地概况
试验地点：广西钦州市浦北县大成镇板铺村香蕉种植试验点，北纬N22° 02′ 53.45″，东经E109° 21′ 4.32″，试验地面积0.17 hm2，上一造香蕉枯萎病发病率50 %以上。钦州市浦北县属湿润的亚热带季风气候，雨水充足，气候温和，年平均气温在22℃左右，自古以来就是香蕉传统种植区，近年来枯萎病发生严重，香蕉生产收到严重影响。
1.2 参试品种及菌肥
参试品种：香蕉抗病品种中蕉4号。
试验菌肥：含枯草芽胞杆菌的佳倍绿牌生物菌肥（泌阳佳倍绿生物肥料有限公司生产），每1 kg原菌剂中含有益菌数≥10000亿个。
1.3 试验设计
在香蕉的三个生长时期，即营养生长期（大叶抽出至花芽分化）、孕蕾期（花芽分化至抽蕾）、果实发育期（抽蕾至果实成熟砍收），分别施用菌肥。观察在不同生长时期施用菌肥对香蕉生长性状、产量性状及枯萎病发生情况的影响。每株香蕉取原菌剂0.5 kg，用5 kg水稀释活化，搅拌均匀后淋施于香蕉植株周围。
试验共设4个处理，每处理3个重复，各处理均保持一致的栽培管理水平：
处理1（CK）：全生长期不施菌肥;
处理2：在营养生长期施2次菌肥，间隔1月;
处理3：在孕蕾期施期施2次菌肥，间隔1月;
处理4：在果实发育期施2次菌肥，间隔1月。
1.4 试验调查及方法
（1） 生长性状调查
试验不同处理各重复选择生长状况一致的5株香蕉定株，即每处理标定15株。从移栽当天起，每隔30 d调查一次标定植株株高、茎周、总叶数等生长性状指标，香蕉出蕾后停止调查，记录数据，汇总取平均值。
株高：香蕉最新完全展开叶与其下一片叶叶鞘相交处到地面的高度。
茎周：离地面30 cm处香蕉茎杆的周长。
（2） 枯萎病发病情况调查
（3） 土壤中尖孢镰刀菌古巴专化型（Fusarium oxysporum f. sp. Cubense， FOC）第4号小种（FOC4）含量检测：在试验小区内采用S形布点法取5个点的土样，每次取蕉叶投影深20 cm土壤0.5 kg，用五点法取混合，四分法分取0.2 kg土样，送至中国热带农业科学院环境与植物保护研究所，采用实时荧光核酸恒温扩增检测技术，检测土样中FOC4病原菌含量。
1.5 数据处理和分析 试验数据用Excel 2013和SPSS 18.0软件进行统计和分析。
2 结果与分析
2.1 不同时期施用生物菌肥对香蕉生长性状及产量的影响
株高、茎径、总叶数反映植株健壮及发育程度，果穗重、单果重、平均果梳数构成香蕉产量指标。试验取3个重复平均值，对比不同时期施用菌肥处理对植株生长性状及产量的影响，结果如表1所示。
由表1中可知，處理2和处理3都是在营养生长时期施用菌肥，其株高、茎周均高于营养生长时期不施用菌肥的处理1和处理4，说明施用生物菌肥有助于健壮植株、但差异不显著;由总叶数可知施用生物菌肥对植株从苗期到抽蕾抽取的总叶数无显著影响，在营养生长期施用生物菌肥的处理2总叶数略大于其他处理;果穗重是香蕉产量的主要构成因素，施用生物菌肥处理高于不施用菌肥处理，差异不显著，最高的是营养生长期施用菌肥处理，其次是孕蕾期，再次是果实发育期;在植株营养生长期和孕蕾期施用生物菌肥处理单果重较高，其次是果实发育期，不施用菌肥处理单果重最低;平均果梳数指标营养生长期最高，其次是孕蕾期，再次是果实发育期，不施用菌肥处理果梳数最少。
由表2各处理不同生长时期的发病株数及病情来看，枯萎病发病高峰在孕蕾后期及果实发育期;对比各处理发病率，施用菌肥区的枯萎病发病率均比不施菌肥有所下降，其中以在营养生长期及孕蕾前期发病率较低，即在营养生长期及孕蕾期施用菌肥对枯萎病的防控效果最为显著，本试验中营养生长期施用菌肥处理病情低于孕蕾期，即对枯萎病防控效果表现最好为营养生长期施用菌肥，其次是孕蕾期，再次是果实发育期。
2.3 不同时期施用生物菌肥对土壤含病原菌个数的影响
不同施用菌肥时期，施用菌肥后的5 d后检测不同处理每克鲜土含病原菌（FOC4）个数，比较不同时期施用生物菌肥对土壤中FOC4含量（个/g）变化的影响，探索FOC4含量和枯萎病发生情况的关系，结果见图1。
由图1可知，随着时间的增加，各处理试验区域内土壤中FOC4总体呈现增加的趋势，不同处理每克鲜土含病原菌个数土壤病原菌存活数量个数有明显差异;处理1不施用菌肥，含菌量在孕蕾前期就达到7130个，在以后的生长期维持在一个较高水平，这个时间段内枯萎病发生情况较为严重;处理2在营养生长期和孕蕾前中期的土壤含菌量维持在4000个左右，孕蕾后期和果实发育期上升到7500个，此时含菌量已超过对照处理，但香蕉植株发病情况较对照处理轻;处理3在孕蕾期施用生物菌肥后含菌量为5380个，孕蕾后期和果实发育期含菌量降低至4180至5180之间，此时土壤含菌量远低于处理2，但香蕉植株发病情况略重于处理2;处理4在果实发育期施用菌肥，施用菌肥之前土壤含菌量上升，于果实发育前期上升至7050个，施用菌肥后降至6550个，此时土壤含菌量低于处理1和处理2，但试验区内植株发病情况要重于处理1和处理2。以上分析可以看出，香蕉植株发病情况与各处理土壤含菌量的差异变化并不完全表现出正相关，土壤含菌量高，则此区域内香蕉植株更容易感病，具体发病情况还与香蕉植株健壮程度及是否受创有关，香蕉枯萎病发病规律有待进行多点多年试验进一步探索。
3 结论
由以上不同施用时期施用菌肥处理香蕉株高、茎周、总叶数、产量指标对枯萎病的防控效果、土壤中病原菌数量等几个指标的对比来看，施用枯草芽孢杆菌生物菌肥有益于健壮植株，施用菌肥处理的果实重显著高于对照处理，单果重及果梳数高于对照处理，但差异不显著;施用生物菌肥可有效降低枯萎病发生情况及病级，对土壤中的病原菌也有明显的抑制作用;对比各处理，营养生长期施用菌肥对枯萎病的防控效果最好，其次是孕蕾期，再次是果实发育期，不施用菌肥处理枯萎病发生情况最严重;从FOC4含量检测指标来看，土壤中病原菌数量差异极大，植株发病情况与各处理土壤含菌量的差异变化并不完全表现出正相关，香蕉枯萎病发病规律有待进行多点多年试验进一步探索。试验结果表明，香蕉抗耐枯萎病品种与生物防治结合是综合防控香蕉枯萎病的一条行之有效的途径。
参考文献
[1]
关键词：枯草芽孢杆菌 生物菌肥 香蕉枯萎病
Abstract：We conducted a comparative experiment on the control efficiency of biological bacterial manure which contains Bacillus subtilis on banana Fusarium oxysporum at different growth stages of banana. Results show that application of bacterial manure can make banana plant strong， effectively reduce incidence of banana Fusarium oxysporum， and obviously inhibit soil pathogens. The best time to apply bacterial manure is at the vegetative growth stage， secondly the bud formation stage， and then the fruit development stage. The control group without application of bacterial manure was attacked by severe Fusarium oxysporum.
Key words：Bacillus subilis; organic bacterial manure; banana Fusarium oxysporum
香蕉枯萎病又稱香蕉巴拿马病或黄叶病，是危害世界香蕉生产的一种毁灭性土传维管束系统病害。香蕉枯萎病最早于1896年在巴拿马发生，1967年我国台湾首次发现香蕉枯萎病，20世纪末该病传入我国广东省珠江三角洲地区，随后传入海南、福建等省，2007年广西发生香蕉枯萎病[3]。香蕉枯萎病病原菌在土壤中潜伏期长，发病迅速，目前还没有找到一种有效的防治香蕉枯萎病的化学药剂可应用于田间。有研究表明，许多微生物对香蕉枯萎病菌具有拮抗作用，用生物防治的方法来控制香蕉枯萎病已成为当前研究热点[4]。试验中，通过土壤分离得到的枯草芽孢杆菌等拮抗细菌对香蕉枯萎病有明显的抑制作用[5]，是一种理想的生防微生物。Perez-vicente等[6]试验证明抗病品种的种植与生防菌施用相结合，对香蕉枯萎病的防治效果可达95 %以上。鉴于此，本单位开展了含枯草芽孢杆菌的生物菌肥在大田试验中对香蕉枯萎病防控效果的研究，对香蕉枯萎病的生物防治研究进行初步的探索。
1 材料与方法
1.1 试验地概况
试验地点：广西钦州市浦北县大成镇板铺村香蕉种植试验点，北纬N22° 02′ 53.45″，东经E109° 21′ 4.32″，试验地面积0.17 hm2，上一造香蕉枯萎病发病率50 %以上。钦州市浦北县属湿润的亚热带季风气候，雨水充足，气候温和，年平均气温在22℃左右，自古以来就是香蕉传统种植区，近年来枯萎病发生严重，香蕉生产收到严重影响。
1.2 参试品种及菌肥
参试品种：香蕉抗病品种中蕉4号。
试验菌肥：含枯草芽胞杆菌的佳倍绿牌生物菌肥（泌阳佳倍绿生物肥料有限公司生产），每1 kg原菌剂中含有益菌数≥10000亿个。
1.3 试验设计
在香蕉的三个生长时期，即营养生长期（大叶抽出至花芽分化）、孕蕾期（花芽分化至抽蕾）、果实发育期（抽蕾至果实成熟砍收），分别施用菌肥。观察在不同生长时期施用菌肥对香蕉生长性状、产量性状及枯萎病发生情况的影响。每株香蕉取原菌剂0.5 kg，用5 kg水稀释活化，搅拌均匀后淋施于香蕉植株周围。
试验共设4个处理，每处理3个重复，各处理均保持一致的栽培管理水平：
处理1（CK）：全生长期不施菌肥;
处理2：在营养生长期施2次菌肥，间隔1月;
处理3：在孕蕾期施期施2次菌肥，间隔1月;
处理4：在果实发育期施2次菌肥，间隔1月。
1.4 试验调查及方法
（1） 生长性状调查
试验不同处理各重复选择生长状况一致的5株香蕉定株，即每处理标定15株。从移栽当天起，每隔30 d调查一次标定植株株高、茎周、总叶数等生长性状指标，香蕉出蕾后停止调查，记录数据，汇总取平均值。
株高：香蕉最新完全展开叶与其下一片叶叶鞘相交处到地面的高度。
茎周：离地面30 cm处香蕉茎杆的周长。
（2） 枯萎病发病情况调查
（3） 土壤中尖孢镰刀菌古巴专化型（Fusarium oxysporum f. sp. Cubense， FOC）第4号小种（FOC4）含量检测：在试验小区内采用S形布点法取5个点的土样，每次取蕉叶投影深20 cm土壤0.5 kg，用五点法取混合，四分法分取0.2 kg土样，送至中国热带农业科学院环境与植物保护研究所，采用实时荧光核酸恒温扩增检测技术，检测土样中FOC4病原菌含量。
1.5 数据处理和分析 试验数据用Excel 2013和SPSS 18.0软件进行统计和分析。
2 结果与分析
2.1 不同时期施用生物菌肥对香蕉生长性状及产量的影响
株高、茎径、总叶数反映植株健壮及发育程度，果穗重、单果重、平均果梳数构成香蕉产量指标。试验取3个重复平均值，对比不同时期施用菌肥处理对植株生长性状及产量的影响，结果如表1所示。
由表1中可知，處理2和处理3都是在营养生长时期施用菌肥，其株高、茎周均高于营养生长时期不施用菌肥的处理1和处理4，说明施用生物菌肥有助于健壮植株、但差异不显著;由总叶数可知施用生物菌肥对植株从苗期到抽蕾抽取的总叶数无显著影响，在营养生长期施用生物菌肥的处理2总叶数略大于其他处理;果穗重是香蕉产量的主要构成因素，施用生物菌肥处理高于不施用菌肥处理，差异不显著，最高的是营养生长期施用菌肥处理，其次是孕蕾期，再次是果实发育期;在植株营养生长期和孕蕾期施用生物菌肥处理单果重较高，其次是果实发育期，不施用菌肥处理单果重最低;平均果梳数指标营养生长期最高，其次是孕蕾期，再次是果实发育期，不施用菌肥处理果梳数最少。
由表2各处理不同生长时期的发病株数及病情来看，枯萎病发病高峰在孕蕾后期及果实发育期;对比各处理发病率，施用菌肥区的枯萎病发病率均比不施菌肥有所下降，其中以在营养生长期及孕蕾前期发病率较低，即在营养生长期及孕蕾期施用菌肥对枯萎病的防控效果最为显著，本试验中营养生长期施用菌肥处理病情低于孕蕾期，即对枯萎病防控效果表现最好为营养生长期施用菌肥，其次是孕蕾期，再次是果实发育期。
2.3 不同时期施用生物菌肥对土壤含病原菌个数的影响
不同施用菌肥时期，施用菌肥后的5 d后检测不同处理每克鲜土含病原菌（FOC4）个数，比较不同时期施用生物菌肥对土壤中FOC4含量（个/g）变化的影响，探索FOC4含量和枯萎病发生情况的关系，结果见图1。
由图1可知，随着时间的增加，各处理试验区域内土壤中FOC4总体呈现增加的趋势，不同处理每克鲜土含病原菌个数土壤病原菌存活数量个数有明显差异;处理1不施用菌肥，含菌量在孕蕾前期就达到7130个，在以后的生长期维持在一个较高水平，这个时间段内枯萎病发生情况较为严重;处理2在营养生长期和孕蕾前中期的土壤含菌量维持在4000个左右，孕蕾后期和果实发育期上升到7500个，此时含菌量已超过对照处理，但香蕉植株发病情况较对照处理轻;处理3在孕蕾期施用生物菌肥后含菌量为5380个，孕蕾后期和果实发育期含菌量降低至4180至5180之间，此时土壤含菌量远低于处理2，但香蕉植株发病情况略重于处理2;处理4在果实发育期施用菌肥，施用菌肥之前土壤含菌量上升，于果实发育前期上升至7050个，施用菌肥后降至6550个，此时土壤含菌量低于处理1和处理2，但试验区内植株发病情况要重于处理1和处理2。以上分析可以看出，香蕉植株发病情况与各处理土壤含菌量的差异变化并不完全表现出正相关，土壤含菌量高，则此区域内香蕉植株更容易感病，具体发病情况还与香蕉植株健壮程度及是否受创有关，香蕉枯萎病发病规律有待进行多点多年试验进一步探索。
3 结论
由以上不同施用时期施用菌肥处理香蕉株高、茎周、总叶数、产量指标对枯萎病的防控效果、土壤中病原菌数量等几个指标的对比来看，施用枯草芽孢杆菌生物菌肥有益于健壮植株，施用菌肥处理的果实重显著高于对照处理，单果重及果梳数高于对照处理，但差异不显著;施用生物菌肥可有效降低枯萎病发生情况及病级，对土壤中的病原菌也有明显的抑制作用;对比各处理，营养生长期施用菌肥对枯萎病的防控效果最好，其次是孕蕾期，再次是果实发育期，不施用菌肥处理枯萎病发生情况最严重;从FOC4含量检测指标来看，土壤中病原菌数量差异极大，植株发病情况与各处理土壤含菌量的差异变化并不完全表现出正相关，香蕉枯萎病发病规律有待进行多点多年试验进一步探索。试验结果表明，香蕉抗耐枯萎病品种与生物防治结合是综合防控香蕉枯萎病的一条行之有效的途径。
参考文献
[1]