【摘 要】
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目的分离纯化细胞角蛋白20(Cytokeratin20, CK20)并加以鉴定,为进一步研制抗CK20单克隆抗体奠定基础.方法培养人膀胱肿瘤T-24细胞系并用免疫组化检测CK20表达,然后大量培养并
【机 构】
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重庆医科大学检验系实验诊断学教研室
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目的分离纯化细胞角蛋白20(Cytokeratin20, CK20)并加以鉴定,为进一步研制抗CK20单克隆抗体奠定基础.方法培养人膀胱肿瘤T-24细胞系并用免疫组化检测CK20表达,然后大量培养并收集细胞,超声波细胞粉碎后,先用萃取、高速离心、透析等方式进行蛋白初分离,然后利用以DE52为介质的阴离子交换层析分离纯化CK20蛋白,以电泳示踪,最后采用SDS-PAGE、HLPC和Western-blotting加以鉴定.结果在阴离子交换层析时出现3组洗脱峰,CK20主要存在第二组峰中,该峰在SDS-PAG
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